Differex中文操作手册.pdfVIP

DifferexTM 系统 原英文技术手册号码：TBD020 本说明书用于产品DC6800 和 DC6801 。 所有的技术文献均可从公司网站 ．得到 请访问公司网站以证实您所使用的技术手册为最新版本 I. 介绍………………………………………………………………………………… 1 II. 产品组成 ………………………………………………………………………… 3 III. 从上皮细胞分离精子……………………………………………………………… 3 A. 准备消化溶液……………………………………………………………… 4 B. 差异抽提操作方法………………………………………………………… 4 IV. 问题及解决方法…………………………………………………………………… 6 V. 参考文献…………………………………………………………………………… 6 VI. 相关产品…………………………………………………………………………… 7 I 介绍 1985, Gill 等(1)开发了在大量上皮细胞存在的情况下富集精子细胞的方 法。在没有还原剂的情况下，上皮细胞经控制裂解后， 通过离心从固体的基 质分离完整的精子及含有来源于裂解的上皮细胞DNA 的缓冲液。然后再通过 对未标于此处的 问题，请与您当 离心沉淀精子及细胞碎片，除去含有上皮细胞DNA 的溶液，但是由于沉淀的 地的办事处或分 松散特性，依然会有含有上皮细胞 DNA 的溶液的残留。 为了得到没有上皮 公司联系。进一 细胞DNA 的精子，需要多次洗涤及离心。尽管费时费力，这种处理方法在过 步的资料可登陆 去将近 20 年的时间里，也没有重大的改变。这种方法打破了除去上皮细胞 网页 DNA 及洗涤过程中精子丢失之间的平衡。由于除去上皮细胞 DNA 及精子丢 失之间的竞争特性，检验人员要花费大量的时间用以决定使用样品的量以及 洗涤的次数，因此检验人员的经验水平在决定本分离方法的成功与否方面发 挥了重要作用。 Differex™ 系统使用标准的蛋白酶 K 消化并结合相分离与差速离心的方 法来分离精子及上皮细胞DNA。经过标准的蛋白酶 K消化后，将样品及缓冲 液加入到含有非水，无毒，可生物降解的分离溶液的离心管中。这种溶液比 水溶液的密度大，并且与水相缓冲液不互溶, 但是比精子的密度小。 注意：本中文操作手册仅供实验参考，在使用中请详细对照原英文技术手册TBD020 。如遇到问题请与普洛麦格（北京）生物技术 有限公司联系，Tel ：010FAX：010E-mail：chinatech@ 技术手册号码：CTBD020 第 1 页 共 7 页 在离心过程中，精子沉淀于离心管的底部。含有上皮细胞DNA的水相溶液位于非水相 溶 液的上方。借助于缓冲液的黄色，很容易将水相溶液除去。通常情况下只会残留一 薄层 水相。这种污染通过加入