第四章 血浆脂蛋白及其代谢紊乱-临床检验学专业ppt课件_精品.pptVIP

谢 谢！ * 血清TG测定方法一般分为: 物理化学法 化学法 酶法 2、甘油三酯测定　　 　 血清中TG的化学组成并不单一，准确求其分子量较为困难。因标准不同，测定结果存在差异。 * （1）化学测定法 1、抽提：关键是选用合适的抽提剂，既要使甘油三酯提取完全，又要消除磷脂、游离甘油和葡萄糖等干扰物质的影响。 2、皂化：甘油三酯水解生成甘油，这一步大都采用KOH作皂化剂 3、氧化：过碘酸在酸性溶液中将甘油氧化成甲醛和甲酸 4、显色：甲醛的定量主要有两种方法： ①甲醛与变色酸(4，5-二羟-2，7-萘二磺酸)在硫酸溶液中加热 生成紫色化合物 ②甲醛与乙酰丙酮在铵离子(NH4+)存在下生成黄色的二乙酰二氢 二甲基吡啶 此法操作繁杂，影响因素多，准确性差，一般少用。 * （2）酶法 用酶直接催化TG水解生成甘油；用酶反应测定甘油；换算出TG含量。目前常规检测方法有：甘油激酶（GK）法和甘油氧化酶（GOD）法 酶法简便、快速、微量、精密。需注意样品中内源性干扰物（游离甘油等）和外源性干扰物（酶制剂中的杂酶等）的影响 * 【参考值】 血清甘油三酯一般随年龄增加而升高，体重超过标准者往往偏高。 成人：0.56～1.70mmol/L 儿童：0.36～1.50mmol/L 升高：＞1.70mmol/L (150mg/dl) * 【临床意义】 原发性高TG血症多有遗传因素，包括家族性高TG血症与家族性型高脂（蛋白）血症等。 继发性高TG血症见于糖尿病、糖原累积病、甲状腺机能减退、肾病综合征、妊娠、口服避孕药、酗酒、高脂饮食等。 甘油三酯降低比较少见，可见于甲状腺功能亢进、肾上腺皮质功能减退和肝功能严重损伤。 * 3、磷脂测定 磷脂(PL)并非单一的化合物，而是含有磷酸基和多种脂质的一类物质的总称。血清PL定量方法两大类 : 测定无机磷化学法和酶法,以酶法广泛应用于临床自动化检测。 参考值：成人1.3～3.2mmol/L * 临床上将Cl0以上的脂肪酸称为游离脂肪酸(FFA) 正常血清中含有: 油 酸(C18:1)占54％ 　　软脂酸(C16:1)占34％ 　　硬脂酸(C18:1)占6％ 另外还有月挂酸(C22:0)、肉豆蔻酸(C14:0)和花生四烯酸(C20:1)等含量很少的脂肪酸，其含量水平极易受脂代谢、糖代谢和内分泌功能等因素影响。 血中FFA半寿期为1～2min，极短。 4、游离脂肪酸测定　　 * 测定血清FFA法有: 滴定法、比色法、原子分光光度法、高效液相层析法、酶法等，一般多以酶法测定。 作FFA测定的标本,一定要注意: 在4℃条件下分离血清并进行测定。贮存的标本仅限于24h内，若保存三天，其升高值约30％，使结果不准确。 参考值: 成人0.4～0.9mmol/L 儿童和肥胖成人稍高 * 荧光法、比色法 、荧光法及比色法较适用。 标本:全血标本室温可保存24h，浆(清) 4～8℃冷藏可保存3天、冷冻可保存1周。脂血和黄胆，测定结果偏高。 参考范围 荧光法：2～4μmol/L 比色法：男性4.14±0.78μmol/L 女性3.97±0.77μmol/L 5、过氧化脂质测定　　 *  基于各种脂蛋白的密度不同，在适当密 度介质和超速离心力场中的行为(漂浮或沉降) 也就不同，借此进行分离和分析。 对仪器和人员要求高；费时； 不适于常规应用，可作为参考方法和研究用。 1、 超速离心法(ultracentrifugation method) 二、血浆脂蛋白测定　　 *   2、电泳分离法(electrophoresis Method）　　 电泳法有效，但较难实施标准化。适于定性或半定量测定。在高脂蛋白血症分型时，一般根据血清外观和血脂(TG、TC)可确定，只有少数情况方需要进行电泳分析。故电泳法不是常规项目。 健康人空腹12h后，血浆中无CM存在。 * 血浆4℃ 16h～24h静置，观察血浆混浊程度，称为血浆静置实验: 　若出现奶油样上层，即CM增加，若下层为混浊者,即VLDL增加。 　若LDL增加，血浆仍呈现透明状态。 　 健康人，实验阴性。 3、血浆静置实验　　 * 脂蛋白是一种既有蛋白质又有胆固醇，还有磷脂的复合体，如何定量，尚无一种较为理想的方法。因为脂蛋白中胆固醇含量较为稳定，因此目前以测定脂蛋白中胆固醇总量的方法作为脂蛋白的定量依据。 参考范围： 血清H