苏丹草植物组织培养实验过程.pptVIP

苏丹草愈伤诱导及其遗传转化体系研究院系： 生命科学学院姓名： 郑媛媛  学号： 20082513330班级： 2008级 指导老师： 张秋胜 目录 引言 实验材料及方法 愈伤组织培养结果与讨论 引言 苏丹草为高粱属作物,一年生优良牧草，马、牛、羊都喜采食，也是鱼类的好饲料 。 本实验主要研究在MS培养基和N6培养基中，不同激素配比对愈伤组织诱导的作用。主要是2,4-D (2，4一二氯苯氧乙酸) 的浓度的差异对愈伤组织诱导率的影响。 苏丹草愈伤组织培养 材料：所需的苏丹草种子由老师提供。 培养基：基本培养基为MS培养基，和N6培养基两种，添加不同的配比激素组成。附加2,4-D((2，4一二氯苯氧乙酸) 2.0、3.0、4.0 mg/L 3个水平和KT0.1mg/L的激素配比，添加活性炭0.15g/L，PH5.8。 种子处理：75%的酒精处理3-4分钟，0.15%升汞消毒25min，用无菌水冲洗6-8次。用无菌滤纸吸去多余的水，用镊子接种在培养基上。 结果与讨论 结果与讨论 激素对愈伤组织的影响：试验发现：在MS培养基中，当2,4-D浓度为4.0 mg/L时，当KT浓度为0.1 mg/L时的诱导效果最好。 在N6培养基中，当2,4-D浓度为3.0 mg/L时，诱导效果最好。 活性炭对愈伤组织的影响：实验证明是否添加活性炭对愈伤组织诱导的影响不大。 本次实验感谢我的导师张秋胜老师和实验室的同学们的大力帮助。感谢各位评审老师的评审。谢谢大家！！！ * 培养条件：种子的诱导生长条件为26℃，暗培养1周左右。 继代培养：选取颗粒状、淡黄色、结构致密、生长迅速的高质量胚性愈伤组织转移到继代培养基上。继代培养基为N6培养基为基本培养基，并添加300mg/L水解酪蛋白，30Omg/L脯氨酸，PH5.8，每个锥形瓶中转接3-4个愈伤组织小块，至于黑暗处，在26℃的条件下进行培养。一般培养7-10天。 与农杆菌共培养 25.00 5 20 4.0 15.00 3 20 3.0 0 0 20 2.0 诱导率/% 形成愈伤组织数量/个 接种数量/个 MS培养基2,4-D浓度mg/L 20.00 4 20 4.0 30.00 6 20 3.0 0 0 20 2.0 诱导率/% 形成愈伤组织数量/个 接种数量/个 N6培养基2,4-D浓度mg/L 不同培养基对成熟种子愈伤组织诱导的影响 5月15日拍摄 5月28日拍摄 *