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细菌大小的测定 目的要求 染色剂和染色的原理 实验材料 实验程序 显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、接种环、载玻片、酒精灯。 石炭酸复红染液（草酸铵结晶紫染液或蕃红染液） 菌种：金黄葡萄球菌或大肠杆菌 细菌染色的方法:　　　　　　　　　　　　　 简单染色法：用一种染色液染菌体后，就可以观察微生物的大小、形状和细胞排列状况，但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。 染色技术的一般过程　　　　　　　　　　 涂片　　干燥　　固定　　染色　　水洗　　干燥　　镜检 目的要求 学习使用目测微尺和物测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。 测定微生物细胞大小是在显微镜下利用测微尺进行。测微尺可分为目镜测微尺和镜台测微尺。目镜测微尺是特制的圆形玻片，中央有一刻度尺（50等分），可放入目镜镜筒内，用于测定细胞大小。镜台测微尺为一载玻片，上贴有圆形盖片，中央有总长度为1mm(100等分)，每小格长0.01mm (10um) 。目镜测微尺每小格大小随显微镜放大倍数不同而改变，使用目镜测微尺进行测量之前必须用镜台测微尺标定，以求出在某一放大倍数下目镜测微尺每小格所代表的长度，然后用标定好的目镜测微尺进行测量。 （1）目测微尺的标定： 1 将目测微尺装入目镜的隔板上，刻度朝下；把物测微尺放在载物台上，刻度朝上。 2 用低倍镜找到物测微尺的刻度，移动物测微尺和目测微尺使两者的第一条刻度线重合， 3 顺着刻度找出第二条完全重合的刻度线。 4 计算两刻度间目测微尺的格数和物测 微尺的格数。 由物测微尺的刻度每格长10μm，得 （2）用目镜测微尺测定枯草杆菌大小 取下物测微尺，将细菌染色标本置于载物台上，然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。测定10个菌体求出平均值 例如：目镜测微尺在油镜下，每格相当于1.5um,若细菌菌体平均长度相当于目镜测微尺的2格，则菌体长度为3um 注意： 校正目测微尺必须针对特定的显微镜 和附件（特定的物镜、目镜、镜筒长度等 ）进行，而且只能在这特定的情况下才可 重复使用。 （1） 目镜测微尺标定结果记录 物镜 物镜放大倍数 目镜测微尺格数 镜台测微尺格数 目镜测微尺每格代表长度（um） 低倍镜 10 油镜 100 （2） 在油镜下测量细菌大小结果记录 菌体编号 大肠杆菌测定结果 金黄色葡萄球菌直径大小结果 宽 长 目尺格数 菌体直径 平均值 目尺格数 菌体宽（um） 平均值 目尺格数 菌体长（um） 平均值 1 2 3 4 5 10 …. * *