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基因克隆的载体 基因克隆的载体 载体（vector）是由在细胞中能 够自主复制的ＤＮＡ分子构成的一种 遗传成分，通过实验手段可使其它的 ＤＮＡ片段连接在它的上面，而进行 复制，作为基因工程的载体，必须具 备以下几个性能： 1、分子较小，可携带比较大的ＤＮＡ片段。 2、能独立于染色体而进行自主复制并且是高效的复 制。 3、要有尽可能多种限制酶的切割位点，但每一种限制 酶又要最少的切割位点（多克隆位点 multiple cloning sites ，MCS） 。 4、有适合的标记，易于选择。 5、有时还要求载体要能启动外源基因进行转录及表 达，并且尽可能是高效的表达。 6、从安全角度考虑，要求载体不能随便转移，仅限于 在某些实验室内特殊菌种内才可复制等等。 载体 功能 克隆载体: 克隆一个基因或DNA片断 表达载体: 用于一个基因的蛋白表达 整合载体: 把一个基因插入到染色体组中 载 体 来源： 质粒载体 噬菌体载体 柯斯质粒载体 真核细胞克隆载体 载体的种类和特征 受体细胞 结构 插入片断 举例 质粒* pUC18/19 , T-载体 E.coli 环状 〈 *8 pGEM- 3z等 9 - 24kb EMBL系列， λ噬菌体 E.coli 线状 Λ gt系列 丝状噬菌体及噬菌粒 E.coli 环状 〈10 kb M13mp系列 pJB8,c2RB, pcoslEMBL, 粘粒载体 E.coli 环状 35- 45kb pWE15/16, pCV BAC (Bacterial ≈300 kb E.coli 环状 Pel oBAC系列 Artificial Chromosome) PAC (P1-derived E.coli 环状 100 - 2000 kb PCYPAC1 Artificial chromosome) YAC (Yeast Artificial 线性染色体 酵母细胞 100 - 2000 kb chromosome ) MAC (Mammalian 哺乳类细胞 线性染色体