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  • 2018-04-18 发布于河南
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血液DNA提取

动物遗传学实验 血液DNA提取及检测 河南农大牧医工程学院 周建设 1.熟练掌握从外周血快速提取基因组DNA的方法; 2.熟悉琼脂糖凝胶电泳的实验过程。 KI 0.9%NaCl 异丙醇或无水乙醇 Eppendorf管 微量加样器等 操作流程 纯化去蛋白 沉淀核酸 洗涤去盐 溶解DNA沉淀 样本裂解 外周血基因组DNA的提取  1、取抗凝血300μl 2、加无菌重蒸水1000μl;13000r/min离心5分钟; 3、弃上清,加100μl 5mol/L KI,旋涡振荡30秒; 4、0.9%NaCl 300μl,450μl氯仿:异戊醇,充分混匀5min;13000r/min离心5分钟 5、吸上清加等体积的异丙醇或者2倍体积的无水乙醇,轻轻混匀,13000r/min离心5分钟 6、弃上清,加800μl 70%乙醇洗涤,13000r/min离心5min。 7、弃去70%乙醇,离心1分钟,将残液用移液器取出,自然干燥;20μl无菌重蒸水,混匀溶解备用。 取10μl的DNA与DNA Ladder Marker进行琼脂糖凝胶电泳分析,分析结果采用紫外灯照相。

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