牛布病（Brucellosis）酶联免疫分析（ELISA）.PDFVIP

牛布病(Brucellosis)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于检测牛血清，血浆及相关 液体样本中布病(Brucellosis)水平。 实验原理： 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法 （ELISA）测定标本中牛布病(Brucellosis)。用纯化的 牛布病(Brucellosis)抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中布病(Brucellosis)相结合， 经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的布病(Brucellosis)抗体结合，形成抗 体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转 化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度 （OD 值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中牛布病(Brucellosis)的存在与否。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 阴性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 阳性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右 （2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次 离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右 （2000-3000转/ 1 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS （PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞 浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分 钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS （PH7.4），用手工或匀浆器