天然药物化学第十一章 生物碱 PPT课件.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 五、提取分离 某中药材中主要含有生物碱类成分，且已知在其总碱中含有如下成分： 季铵碱、酚性叔胺碱、非酚性叔胺碱、水溶性杂质、脂溶性杂质 现有下列分离流程，试将每种成分可能出现的部位填入括号中。 * * 课外作业 1、中药萱草根中含有大黄酸、大黄酚、决明蒽醌、决明蒽醌甲醚等成分，试设计提取分离流程。 决明蒽醌 决明蒽醌甲醚 * 2、中药虎杖中含有大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄素-8-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-D-葡萄糖苷、白藜芦醇、白藜芦醇葡萄糖苷等成分，试设计从虎杖中提取分离游离蒽醌的流程。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * （2）判断分离的难易程度——萃取次数 β ≥ 100 1次萃取可达90%以上 ≥ 10 萃取需10~12次 ≈ 2 需1000次以上萃取（CCD法） ≈ 1 不能分离 * （3）萃取溶剂的最佳体积——容积比（R） 例：设K1=1.3 K2=3.0 按上式计算得 R=1/2。 即，有机相与水相容积比为1:2，1份有机相与2份水相进行萃取。 * * * 3.色谱法 ⑴吸附剂：柱色谱法常用氧化铝（偶用硅胶）； ⑵展开剂：游离Alk常以苯、乙醚、氯仿等溶剂洗脱 ⑶化合物极性判断： ①相似结构：双键多、含氧官能团多——则极性大 ②在含氧官能团中： * 提取分离实例——长春碱与长春新碱 * 长春花全草 (干粉80目) 苯渗漉液 药 渣 苯 液 H+/H2O 苯渗漉 pH=4 6%酒石酸水溶液萃取 过滤，氨水碱化至 pH=6~7 CHCl3提 除水杂 除脂杂 除碱性较强的成分 * H2O CHCl3 弱碱 Alk硫酸盐 回收氯仿，蒸干 溶于无水乙醇 H2SO4调pH=3.8~4.1 Alk沉淀 溶于H2O，氨水碱化至 pH=8~9 CHCl3萃取 除脂杂 除水杂 精 制 * H2O CHCl3 游离Alk 长春碱 醛基长春碱 回收氯仿 溶于苯:氯仿(1:2)液中 通过Al2O3吸附柱 用苯:氯仿(1:2)洗脱 色谱分离 * 一、理化鉴定 物理方法——形态、 颜色、 熔点 化学方法 ——沉淀反应 、显色反应 第四节 鉴 定 * 沉淀反应 1. Dragendorff ’试剂 (KBiI4试剂) 2. Mayer’试剂 (K2HgI4) 3. Wagner ’试剂 (KI.I2) 4. Bertrad ’试剂 (SiO2.12WO3.nH2O) 注意： 反应介质？ 干扰物质？ 供试液的制备：排除水溶性杂质的酸水液 * (一)薄层色谱法 1.硅胶TLC 展开剂: 三氯甲烷为基本溶剂多用碱性下 有机溶剂展开 显色剂: 改良碘化铋钾——橘红色 ALK硅胶TLC鉴定易拖尾，如何克服？ ⑴展开剂中加入有机碱（乙二胺、氨水） ⑵展开缸中氨蒸汽饱和 ⑶铺板时加入无机碱克服硅胶的酸性 酚酸类成分硅胶TLC、PC如何克服拖尾现象？ 二、色谱鉴定 * 2、分配薄层色谱 支持剂：硅胶或纤维素 固定相：甲酰胺 展开剂：甲酰胺饱和的亲脂性有机溶剂 显色剂：日光或荧光下观察或选用改良碘 化铋钾试剂 * （二） 纸色谱（PC） 以离子状态层析时——选择极性较大的展开剂 正丁醇∶醋酸∶水（4∶1∶5上层） 以分子状态层析时——用甲酰胺作固定相，以甲酰胺饱和的亲脂性有机溶剂（苯和氯仿等）作展开剂 显色试剂中不能含有硫酸。 * （三）高效液相色谱法（HPLC） 反相分配色谱 固定相：Rp C18（C8）烷基键合相 流动相：甲醇（乙腈）-水，含有约0.01mol/L～ 0.1mol/L磷酸缓冲液、碳酸铵或醋酸钠（pH4～pH7） * （四）气相色谱法（GC） 挥发性生物碱的分离检识——麻黄碱的分离 色谱柱： HP-5石英毛细管柱，5.25m×2mm， 柱温90℃（1min）3℃/min124℃ （3min）20℃/min250℃ 检测器：NPD。He（载气）1.4ml/min， H2 3.2ml/min，空气90ml/min。检测器温度280℃， 进样口220℃。 用二