《微生物检验基础知识》－.ppt

（1）新购进的玻璃器皿，均含有游离碱，故应先浸于洗液或2mol/L盐酸内浸泡数小时，再用自来水冲洗干净。待干燥后，灭菌备用。 （2）使用过得玻璃器皿，未曾污染细菌时，尽可能立即用热 的肥皂水或去污粉洗刷清洁，再用清水冲数次， （3） 已污染的玻璃器皿，应先消毒再洗涮。被污染然的玻片、吸管可浸于消毒液内24h再洗涮。污染的培养皿、试管可高压灭菌后再洗涮。 （4）吸管用附有污物可用洗液浸泡。金属器械不能浸于清洁液内，避免腐蚀。 （5）附有油污的器皿，若用热的肥皂水不能洗净时，切不可用洗液浸泡，而应先用热的酒精、汽油或丙醇洗涤;或用氢氧化钠热溶液2（％）浸泡10-15分钟，然后再用稀盐酸洗一次，用水冲洗数次。油污如仍未出去，再重复以上手续一次。 （6）载波片及盖玻片用过后，分别浸入5%体积分数的来苏液或清洁液中过夜，取出后水洗。盖玻片用软布擦干即可。用于细菌染色的载波片须放入肥皂水中煮沸10min，然后用毛刷沾肥皂洗，再经清水洗净后浸入体积分数为95%酒精中。 * 概念： 适合微生物生长繁殖或累积代谢产 物的营养基质。 a.基础培养基：是其他培养基基础，如营养琼脂 b.加富培养基：营养要求高的微生物，如血琼脂、BHI琼脂 c.鉴别培养基：区别不同微生物，如伊红-美蓝琼脂培养基 d.选择培养基：加入化学药品（无营养作用）方式使所研究的菌生长，如分离酵母菌、霉菌加入抗生素（孟加拉红）。 e.厌氧培养基：常用的有庖肉培养基、MRS培养基 f.特殊培养基：如乳糖胆盐发酵管 g.生化实验培养基：用于微生物鉴定 h.增菌培养基：所需微生物快速生长 1、光学显微镜是由光学放大系统和机械装置两部分组成。光学系统一般包括目镜、物镜、聚光器、光源等；机械系统一般包括镜筒、物镜转换器、镜台、镜臂和底座等 2、目镜只起放大作用，不能提高分辨率，标准目镜的放大倍数是十倍。显微镜总的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的乘积，而物镜的放大倍数越高，分辨率越高。 3、当空气为介质时折射率为1，而香柏油的折射率为1.51，和载片玻璃的折射率（1.52）相近，这样光线可以不发生折射而直接通过载片、香柏油进入物镜，从而提高分辨率。 油浸镜的工作距离很小，所以要防止载皮片和物镜上的透镜损坏。 4、用过油浸镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着二甲苯擦拭2—3次，最后再用擦镜纸将二甲苯擦去。镜头的保护最为重要。镜头要保持清洁，只能用软而没有短绒毛的擦镜纸擦拭。擦镜纸要放在纸盒中，以防沾染灰尘。切勿用手绢或纱布等擦镜头。物镜在必要时可以用溶剂清洗，但要注意防止溶解固定透镜的胶固剂。根据不同的胶固剂，可选用不同的溶剂，如酒精、丙酮和二甲苯等，其中最安全的是二甲苯。方法是用脱脂棉花团蘸取少量的二甲苯，轻擦，并立即用擦镜纸将二甲苯擦去，然后用洗耳球吹去可能残留的短绒。 　　染色、制片、镜检 染色方法 单染法 复染法 苯胺黑 美兰染色 革兰氏染色 * 染色原理 革兰氏染色 色差增大，轮廓清晰，便于识别 菌体细胞壁结构不同 固定结构，能够着色，不被水冲掉 染色目的 固定目的 * 革兰氏染色 结晶紫 初染 酒精 脱色 番红 复染 碘液 媒染 碘液 * 镜检结果 G+ G- * 显微镜 * 微生物检验基本方法 接种、培养 制片、染色、观察 * 进化地位 伯杰氏细菌鉴定手册、真菌鉴定手册 原核细胞:有明显核区，无核膜、核仁 真核细胞:有核膜，核仁 细胞核 * （1）按形态分 球菌、杆菌、螺旋状 （2）按细胞结构（染色）分 革兰氏阳性菌 (G+) 革兰氏阴性菌(G-) 革兰氏染色是鉴别细菌种类的重要方法 （3）按代谢类型分： 自养型 光能自养（能量来自光能，以CO2为碳源，蓝细菌、红螺菌） 化能自养（能源和碳源均来自无机物，亚硝化假单胞菌属） 异养型 光能异养（光为能源，有机物为碳源，紫色非硫细菌） 化能异养 （能源和碳源均来自有机物，最普遍的微生物的营养类型） （4）按细菌呼吸类型分（对氧的需求）需氧厌氧（还有严格的）兼性厌氧 细菌有多种不同的形态, 但主要分为三种: 球菌, 杆菌, 螺旋菌. 形状只是细菌特征的一个内容, 其他的特征还包括: 大小, 细胞结构, 运动性, 芽孢, 荚膜, 和细菌之间的相互关系. 细菌间的相对位置也是一个重要的区分特征 球菌当成双排列时叫双球菌(Diplococci ), 链状排列时叫链球菌(Streptococci), 像葡萄状排列叫葡萄球菌 Staphylococci, 当四个或八个聚集排列, 叫八叠球菌(Sarcina ) 杆菌的长度和粗细是不一样的, 有些会形成链状. Bacilli 是小杆的意思 TM-00027:22 革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰