5疾病产生的分子基础教学教案.ppt

疾病产生的分子基础 Molecular Basis of Diseases Fundations ;目 录;一、基因结构、表达异常与疾病;一、基因结构、表达异常与疾病;一、基因结构、表达异常与疾病;;一、基因结构、表达异常与疾病发生;基因结构示意图;1. 基因突变的类型;1. 基因突变的类型;1. 基因突变的类型; 2.基因突变引起的遗传效应;*;3. 基因突变影响不均一核RNA(hnRNA)的剪接;血红蛋白结构;血红蛋白病——镰刀形细胞贫血症;;血红蛋白病类型;基因突变类型 异常Hb 氨基酸变化 临床特征 错义突变 Hb Shuangfeng α27Glu→Lys(GAG→AAG) 不稳定Hb病 Hb S β6Glu→Val(GAG→GUG) 镰刀型细胞贫血 Hb Bibba α136Leu→Pro(CUG→CCA) 不稳定Hb病 无义突变 Hb Mckees Rocks β145Tyr→终止(UAU→UAA) 不稳定Hb病 终止密码突变 Hb Constant Spring α142UAA→CAA--- --- α-地贫 (延长：142Gln--- ---173UAA) 密码子缺失 Hb Gun Hill β91～95缺失 不稳定Hb病 密码子插入 Hb Grady α118与119间插入3个氨基酸 无明显症状 移码突变 Hb Tak β147UAA→ACU AA--- 不稳定Hb病 ---158UAA(Thr) ; 5. 常见单基因病：;囊性纤维化病;囊 性 纤 维 化 病;Gene therapy of CF; （二）细胞间信号异常 ---导致基因表达变化引起疾病;（三）细胞内因素导致基因表达异常引起疾病;二、基因结构和表达与疾病的研究策略;;（1）单链构象多态性(PCR-SSCP);PCR产物用特异性内切酶消化切割成不同大小片段，直接在琼脂糖凝胶电泳上分辨。不同等位基因经切割后产生不同长度的DNA片段条带。;RFLP---Restriction Fragment Length Polyhmorphism;（3）直接测序法;;*;（5） SNaPshot法;(6) Mass Array法;2．基因表达水平分析;（1）差异显示技术(mRNA differential display reverse transcription chain reaction, DDRT-PCR);;;（2）表达芯片;;;(3) RNA-Seq;*;（1）转基因技术;*;;;（2）基因敲除技术;① 利用基因同源重组进行基因敲除;② 利用随机插入突变进行基因敲除——基因捕获法 ;③ What is RNAi ?;转录后基因表达抑制现象的发现;RNA干扰(RNA interference, RNAi) RNAi 是将一段双链的RNA 序列导入机体或细胞中, 机体或细胞中与之有同源序列的基因表达将会受到抑制, 甚至表达受到完全抑制 ;基因敲除技术与诺贝尔奖;（5）基因诱导超表达技术;三、HGP与疾病相关基因的研究;同一种细胞或组织，处于不同的状态（生理与病理等），发育的不同阶段，受到外界的不同影响时，都可能使细胞中蛋白质的情况产生相应的变化