紫外－可见分光光度计doc.doc

紫外－可见分光光度计 （一）仪器特点与用途 紫外--可见光谱仪涉及的波长范围是0.2－0.8微米（对应波数50000－12500cm-1），它在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构 （二）基本工作原理 利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。 （三）仪器的基本组成部件 紫外--可见分光光度计的基本结构：是由五个部分组成：即光源、单色器、吸收池、检测器和信号指示系统。 ? 测定过程：由光源发出的光，经单色器获得一定波长单色光照射到样品溶液，被吸收后，经检测器将光强度变化转变为电信号变化，并经信号指示系统调制放大后，显示或打印出吸光度A（或透射比T），完 TU-1810SPC紫外可见分光光度计 （四）操作步骤 TU-1810SPC紫外可见分光光度计操作规程 一、开机：开打印机电源—?开光度计电源—?开计算机电源。 二、点击UVWin图标进行仪器自检。 （一）光谱扫描： 1.点击［光谱扫描窗口］—?选择［测量］菜单下［参数设置］： （1）［参数设置］： 在［M测量］下［光谱扫描光度方式］处选Abs—?在［显示范围］的［最大］处填1.000，［最小］处填0.000—?在［扫描参数］的［起点］、［终点］输入相应波长（小、大），在［速度］处选快，［间隔］处选0.1nm—?在［扫描方式］的［自动扫描］处打√—?在［自动切换样品池］处打√—?在［扫描完成自动适应窗口］处打√—?在［显示全部光谱］处打√—?点击［确定］。 （2）附件设置： 在样品池中放入标准样品—?［样品池］选八联池—?将?置于［位置］第一位置，在［类型］（序号1）处选空白—?将?置于［位置］的第二位置，在［类型］（序号2）处选样品，依次类推—?将?置于［位置］的不使用的位置上，点击［类型］选未使用—?将?置于第一位置—?点击［复位］—?点击［确定］。 2.光谱扫描： 点击［基线］—?放入空白样品池—?点击［确定］—?点击［开始］—?放入空白样品池—?点击［确定］。 3.查看光谱信息： 选择［图形］菜单下的［光谱信息］或点击 按纽—?点击任意一条光谱线，在右侧的详细信息窗口中会显示其详细信息。 4. 保存测量文件： （1）点击［文件］—?点击［另存为］—?［保存在］B8Z盘上—?［文件名］标准曲线—?［保存文件类型］光度测量数据。 （2）点击［注释］—?在［分析员］处输入实验人员名字—?在［样品名］处输入所做标准曲线名称—?在［注释］处输入要注释的内容—?点击［确定］—?点击［保存］。 （二）、光度测量： 1.点击［定量光度窗口］—?选择［测量］菜单下［参数设置］： （1）［参数设置］： 在［M测量］下的［波长］处输入波长值—?点击［添加］—?在［重复测量］下选［自动］—?在［根据样品池数量自动重复测量］处打√—?在［光度模式］处选Abs—?在［起始标号］选1—?点击［确定］。 （2）附件设置： 在样品池中放入标准样品—?［样品池］选八联池—?将?置于［位置］第一位置，在［类型］（序号1）处选空白—?将?置于［位置］的第二位置，在［类型］（序号2）处选样品，依次类推—?将?置于［位置］的不使用的位置上，点击［类型］选未使用—?将?置于第一位置—?点击［复位］—?点击［确定］。 2.光度测量： 点击［自动校零］—?放入空白样品池—?点击［确定］—?点击［开始］—?放入空白样品池—?点击［确定］。 3. 保存测量文件：同上。 （三）定量测定： 1.点击［ 定量测定窗口］—?选择［ 测量］菜单下［ 参数设置］： （1）参数设置：点击［ 单波长法］—?在［ 主波长］处输入测定波长—?在［样品编号］在标准样品和未知样品标号处输入1长—?在［其他设置］下［自动切换样品池］处打√—?点击［确定］。 （2）校正曲线选项：在［曲线方程］选Abs=f(c) —?在［方程次数］选一次—?［浓度单位］选mg/L—?［零点插入］打√—?［曲线评估］选R2—?［校正方法］选浓度数法—?点击［确定］。 2.标准曲线测定： （1）在样品池中放入标准样品。 （2）附件设置： 在［样品池］选八联池—?将?置于［位置］第一位置，在［类型］（序号1）处选空白—?将?置于［位置］的第二位置，在［类型］（序号2）处选样品，依次类推—?将?置于［位置］的不使用的位置上，点击［类型］选未使用—?将?置于第一位置—?点击［复位］—?点击［确定］。 （3）在定量测定窗口的［标准样品表格］处点击［编号］输入1—?在［浓度］输入浓度