生物大分子的分离纯化和鉴定教材课程.pptVIP

* * 生物大分子分离纯化和鉴定 生物大分子通常是指在生物体内存在的或生物体 代谢产生的具有特殊生物学功能的高分子化和物，主 要包括蛋白质、酶、核酸、多糖和脂类。 生物材料的选择与处理 一、选择生物材料原则： 有效成分含量高，稳定，来源丰富，保持新鲜，提取工艺简单，成本低。如：用酵母提RNA，用牛奶提酪蛋白，用大蒜提SOD(超氧化物歧化酶) 二、生物材料处理： 1、动物脏器：冰冻：-10℃冰库（短期保存） -70℃低温冰箱（数月） 干燥：可长期保存 2、植物组织：10小时内置-4 -30℃冰箱储藏备用 3、微生物：胞外产物（如发酵液），低温短时储藏。 胞内产物，则应收集菌体或细胞，制成冻干粉于4℃保存（数月不变质） 除了体液和微生物胞外的某些蛋白质和多肽以外,大多数生物大分子都存在于细胞之内. 细胞破碎 1、酶学破碎法：外加酶制剂、自溶法。 2、机械破碎法：高速捣碎法、高速均浆法、高速磨珠法 3、物理破碎法：温差法、压差法、超声波 4、化学破碎法：有机溶剂法、表面活性剂（SDS 等） 金属螯合剂（Mg2+、Ca2+、EDTA）、化学变性剂。 蛋白质的分离纯化 依据蛋白质在溶液中的性质不同（溶解度、电荷、相 对分子质量的大小，特异