25-现代分子生物学-土壤微生物基因表达的研究分析-胡忠.pptVIP

4.研究环境微生物的内容及方法 各种方法和技术 培养方法：形态、生理生化指标等，16S rRNA技术 原位方法： 16S rRNA结合DNA芯片技术 4.1.环境微生物种类的鉴定 环境微生物的鉴定——形态、理化指标 16S rRNA是原核生物的一种核糖体RNA 其在生物进化过程中，序列变化非常缓慢，可用来标记生物进化距离和亲缘关系。 分析的一般方法是从微生物样本中提取16S rRNA基因片段，通过测序获得序列信息，再与16S rRNA数据库中的序列进行比较，确定其在进化树中的位置，从而鉴定微生物种类 目前，GEN-BANK已经涵盖了不下10万种原核生物的16S rRNA基因序列信息 16S rRNA分析技术 稳定同位素探针结合FISH鉴定微生物种类 培养方法：抗逆，特殊氮源、碳源的利用，毒性等 原位方法：特定基因的表达研究 4.2.环境微生物功能的鉴定 原位研究环境微生物的固氮基因 功能基因的定性：基因芯片，同源序列克隆，环境基因组计划，差异显示技术，分子信标 功能基因的定量：Northern，原位杂交，RNase保护实验，RT-PCR 4.3.对土壤微生物基因表达的研究 mRNA差异显示技术 土壤微生物的基因表达 2009.3.10 了解微生物的功能 了解微生物与环境的关系 有益微生物 有用的基因 环境指标 1.为什么要对土壤微生物进行研究 对微生物种类定性 对微生