5.3 血红蛋白的提取与相关分离.pptVIP

原理： 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。 一、血红蛋白的提取和分离 （一） 凝胶色谱法（分配色谱法） 2.凝胶： 大多数凝胶是由多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂糖）构成的多孔小球体，内部有许多贯穿的通道。 根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离。 1.原理： 3.凝胶色谱法分离蛋白质的原理和具体过程 凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示 （二）缓冲溶液 1.概念: 在一定的范围内，凡是能够抵制外界的酸和碱的影响使原来溶液PH值基本保持不变的混合溶液。 2.缓冲溶液的配制: 通常由1－2 种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同PH范围内使用的缓冲液。 在本课题中使用的缓冲液是磷酸缓冲液，其目的是:利用缓冲液模拟细胞内的PH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能。 （三） 电泳： 1.概念： 带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。 2.原理： 利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小，形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 3.类型: 琼脂糖凝胶电泳、聚丙稀酰胺凝胶电泳。