第四章 现代液相色谱分离技术.docVIP

第四章 液相色谱分离技术 第一节 液相色谱仪器系统 4．1．1 液相色谱仪基本组成 现代液相色谱仪主要分为分析、制备、专用三种类型。虽然各类仪器的型号很多，性能各异，应用范围不同，但是其基本组成部件是类似的，即由输液系统、进样系统、柱分离系统、检测和记录系统组成，包括溶剂贮液器、高压泵、进样器、色谱分离柱、检测器、记录仪等主要部件，见图4-1，还有梯度、温度控制器、自动进样器、数据处理装置等。 4．1．2 溶剂贮存器及溶剂脱气 溶剂贮存器通常用不锈钢、玻璃或聚四氟塑料制成，体积为0.5-2升。在使用过程中，一定要盖严，以免溶剂挥发影响流动相组成比例的变化。所有溶剂在放入溶剂瓶之前，一定要过滤。液相色谱的流动相在进入高压泵之前，还要脱气，否则，很容易在系统的低压部分逸出气泡，气泡的出现，不仅影响色谱柱的分离效率，而且影响检测器的局限稳定性，降低灵敏度，甚至不能正常工作。 常用的脱气方法有抽真空法、吹氦法、超声波脱气法等。真空法和超声波法分别将流动相处于一定真空度下和超声波清洗器中进行脱气；吹氦法是在表压1公斤/平方厘米，流速60ml/min的条件下保持15min，氦气将溶剂中的空气带出并使溶剂饱和。 流动相 样品 馏分接收仪 图4-1 现代液相色谱仪结构框图 4．1．3 输液系统 高压泵是现代液相色谱仪的关键部件之一，其功能是将贮液器内的流动相以高压的形式连续不断地送入液路系统，使样品在色谱柱中完成分离过程。泵的性能优劣直接关系着整个分析结果的可靠性，为得到好的分离效果，对泵有以下严格要求， 输出压力高：150-300公斤/平方厘米柱入口压力，最高输出压力应达到500公斤/平方厘米。 流量范围广：分析型的在0.1-10ml/min，制备型的在10-100 ml/min。 流量稳定：流量重复性和精度在0.5%左右。 耐腐蚀：适合于各种溶剂、缓冲溶液。 其他：密封性好，泵室体积小，便于清洗，便于实现梯度洗脱。 1.气动泵 是最简单的高压泵，是现代液相色谱中应用最早的一种。它是以高压气源为动力，调节气压可以调节流量。应用较多的是气动放大泵，根据压力传导原理设计制成的，主要部件由汽缸和液缸组成。 2.往复柱塞泵 这是目前用的最多的一种，它由液缸、柱塞、单向阀、驱动机构组成，见图4-2。 活塞 色谱分离柱