7蛋白质的分离与相关纯化.pptVIP

生物化学;1 蛋白质的酸碱性质;一、蛋白质的酸碱性质;;;二、蛋白质的大小与形状 ;π: 渗透压 R : 气体常数 T：绝对温度 c: 溶质的浓度（g/m3） π/c 对c作图，在c趋近于零时得出Mr;菲克第二定律 扩散不仅与蛋白质的分子量有关，还与分子形状有关;;;③离心机转速与离心力列线计算图;超离心法类别 1#密度梯度离心法（ density gradient ） 2* 沉降速度法（sedimentation velocity） 3*沉降平衡法（sedimentation eguilibrium）;密度梯度离心法#;颗粒物质或溶质在超速离心场中的沉降速率。用小写斜体s表示。s=v/a，其中a为重力或离心加速度，v为沉降速度，即沉降系数为每单位离心力场的沉降速度。 ;;;原理示意图; Vt ：柱床 “总容积”， Vo：即存在于柱床内凝 胶颗粒外面空隙之间的 水相容积 Vi：即凝胶颗粒内部所 含水相的容积。 Vg：凝胶本身的容积；;分配系数（Kd） ; Ve=K1-K2lgM K1、K2为常数，Ve可用如下表达式代替，Ve-Vo（分离体积）， Ve/Vo（相对保留体积），Ve/Vt（简化洗脱体积），Keff（相对洗脱体积） 在不同型号凝胶上蛋白质的选择曲线的差异;排阻范围的选择;;凝胶装柱 ;;