P53与肝癌的基因相关治疗.pptVIP

* * p53与肝癌的基因治疗 2011级研究生四班：许腾、庄步强、高庆强、 刘稳顺、江海波 肝癌 机制 抑癌基因 p53 p53基因与肝癌的基因治疗 存在的问题 展望 肝癌 概念：指肝细胞 或 肝内胆管细胞 较常见的恶性肿瘤，发病率仅次于胃癌和食管癌 本病以40～49岁为多，男女发病率之比为2～5∶1 每年新增病例：50多万 主要临床表现：肝区疼痛、肝脏肿大、黄疸、肝硬化症状等 治疗：手术、介入、放疗、化疗、生物和免疫治疗等 5年病死率：超过95% 发生的癌肿 机制 肿瘤发生发展过程中，由于各种基因表达及其调控的变化，使细胞在信号转导网络上表现出与正常细胞的显著差异。正常细胞的一些信号转导通路在肿瘤细胞中表现为过度活跃，而另一些信号转导通路则被阻断。这种细胞内信号转导的异常干扰了细胞对增殖、分化、凋亡等多方面的自身调控，特别是造成细胞增殖和凋亡失控，成为肿瘤发病的重要分子基础。 随着分子生物学和免疫学技术的飞速发展，基因治疗技术在肿瘤的治疗中具有广阔的前景。基因治疗的方式有两类，一类为基因矫正与置换，即将缺陷基因的异常序列进行校正，对缺陷基因进行精确的原位修复；另一类为基因增补，不去除异常基因，而是通过外源基因的非定点整合，使其表达正常产物，从而补偿缺陷基因的功能，达到治疗目的的一种方法。 抑癌基因 抑癌基因的突变、缺失及失活在肝癌的发生发展中起着关键性的作用。目前，新发现的抑癌基因层出不穷，较常见的有p53、p16、Rb、BCL-XS等。随着人们对肝癌发病机制的深人了解，越来越多的证据表明：p53基因的突变与失活和肝癌的发生发展有着密切联系 。近年来，随着手术、放疗及生物治疗等方法的研究进展，使肿瘤综合治疗水平有了明显提高，尤其是肿瘤体外细胞和动物模型基因治疗，逐渐从单纯的基础研究过渡到临床研究和应用。本文主要从p53在肝癌基因治疗方面作一简要介绍。 p53 生物体所有组织都存在p53蛋白，在整个进化中变现高度保守。虽然p53对生命不是必需的，但是在细胞水平维持遗传稳定性起关键作用。这是极端重要的，因为遗传损伤逐渐导致肿瘤发生和产生癌。六分之一人群由于p53功能缺陷发展成癌这一统计判断，强调指出p53作为一种肿瘤抑制蛋白的重要性。 在对DNA损伤应答时激活p53蛋白，以转录因子而起作用，能结合DNA特异序列（p53应答元件），而且上调靶基因的表达。在这些条件下，p53诱导细胞生长停止或者程序性细胞死亡（凋亡）。这两种应答预防细胞群内遗传损伤的复制和扩增。 DNA damage p53 Cell growth arrest Apoptosis p53 activation and accumulation 细胞内p53蛋白的浓度增加是其对DNA损伤的应答。这种作用不依赖于基因转录而涉及转录后的调控机制，与预先存在p53mRNA增加的翻译有关。在整个基因表达调控中，转录后的机制是重要的，而且特别是可能比转录调控有更快的应答。该过程涉及胞浆内mRNA-蛋白质的相互作用，但是p53浓度增加的精确机制是不清楚的。 病毒法 常用的病毒以逆转录病毒和腺病毒作载体，其中逆转录病毒载体只感染处于分裂期的细胞，如肿瘤细胞，而对高分化不分裂的细胞就不能实施基因转移。腺病毒载体则对各期的细胞均可感染，所以目前腺病毒载体更常用作p53转移的载体，腺病毒介导的p53基因治疗已广泛开展。 Rei-set M等通过实验证实：腺病毒介导的基因转移可有效地将p53基因导人肿瘤细胞中；以GFP为报告基因，观察到了腺病毒对肝癌细胞BEL402 、HLE及HuH 7均有很高的转染率，腺病毒能有效地将目的基因导入肝癌细胞 中并高效表达。BIY2102腺病毒载体转染后能显著提高 p53突变的HIE和HUH27细胞对顺铂和丝列霉素2C的敏感性，增强了化疗药物对HIE和HUH27细胞的杀伤作用，这为以腺病毒为载体将目的基因导人肝癌细胞提供了前提。有资料显示：用野生型p53腺病毒载体经肝动脉注射治疗转移性肝癌的临床试验 ，野生型p53基因导人肝癌细胞中，可以发挥杀灭或抑制肝癌细胞生长的作用 ，Terence 等以受体介导基因转移系统介导野生型 p53转染含突变 p53的肝癌细胞株，发现