实验二 血清γ球蛋白的分离纯化以及鉴定.pptVIP

实验二 血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定;层析技术 实验原理 实验思路 实验流程及操作注意事项;层 析 技 术;2. 依据：混合物中各组分的理化性质差异—吸附力、分子形状、大小、酸碱性或分子极性、分子亲和力以及分配系数。;固定相—固定不动流动相—对固定相作单向相对运动，推动样品中各组分通过固定相向前移动。各组分理化性质不同，对流动相和固定相具有不同的作用力，因此在流动相推动样品通过固定相的过程中，通过不断地吸附、解吸、吸附、解吸作用，造成混合物中各组分在固定相中的迁移距离不等，达到分离。;4．分类：①流动相的物理状态：气相和液相→ 气液/固，液固/液②方式：纸、薄层、柱③原理：吸附、分配、凝胶、离子交换、亲和、金属螯合、疏水、反相;5．凝胶层析(凝胶过滤、凝胶色谱、分子筛层析、分子排阻层析)①定??：指混合物随流动相流经固定相的层析柱时，混合物中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。;②基本原理：固定相：凝胶，惰性三维空间多孔网状结构，故称分子筛，包括琼脂糖、交联葡聚糖、聚丙烯酰胺、琼脂糖-葡聚糖复合凝胶。流动相：洗脱液;长链状葡聚糖分子间以环氧丙烷连接;凝胶层析的基本原理;l 分子大小不同混合物上柱； 2 洗脱开始，小分子扩散进人凝胶颗粒内，大分子被排阻于颗粒之外；3 大小分子分开： 4大分子行程较短，已洗脱出层析柱，小分子尚在进行中;数学模型 ;Kd—