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细胞DNA定量分析的其它用途 细胞DNA定量分析早期诊断肺癌 常规痰细胞学检查诊断肺癌敏感性很低 肺癌发达国家中病死率最高 没有广为接受的方法进行筛查及早期诊断 常规痰细胞学检查仅能得到10%--23%的阳性结果，即使是最有经验的细胞学医师，阳性率只可能达到20%--30%。 常规痰细胞学检查和DNA定量分析的比较性研究 痰标本来自833个体，其中 肺癌177例 非典型增生98例 无异常发现者558例 标本来自5个不同城市的7家医院 临床诊断 无异常发现：至少胸部x光检查正常 肺癌 非典型增生者均由病理学检查证实 双盲法分组研究，评估常规法、DNA定量法和两种方法联合使用可检出的痰细胞中 细胞DNA定量分析能提高肺癌的检出率 常规细胞学 敏感性 特异性 DNA定量分析 敏感性 特异性 腺癌 14% 90% 60% 90% 早期腺癌 14% 90% 45% 90% 细胞DNA定量分析早期诊断肺癌标本种类 痰 支气管灌洗物和刷取物 细胞DNA定量分析系统检测胸腹水中的癌细胞 腹水细胞学检查鉴别癌性和炎性腹水 腹水细胞学检查在鉴别癌性腹水和炎性腹水中起着关键性作用 63例腹水标本被包括在研究中 50~100ml腹水经离心后制片，巴氏和DNA染色 每例至少有4000个腹水细胞核接受DNA定量分析 细胞DNA定量分析用于炎性和癌性腹水的鉴别诊断 较常规细胞学方法更客观、敏感 腹水性质 例数 炎性细胞（%） 2倍体细胞（%） 异倍体细胞（%） 炎性腹水 急性炎症 4 46.8±6.6 46.0±8.0 0.4±0.1 慢性炎症 7 46.0±1.6 74.0±18.0 0.5±0.8 结核性 15 8.8±1.1 76.0±3.8 0.6±0.2 癌性腹水 恶性间皮瘤 4 5.8±1.0 66.0±11.0 3.4±1.6 转移性肿瘤 33 4.8±1.0 72.0±3.9 9.7±1.0 对炎性和癌性腹水的正确诊断率 炎性腹水 癌性腹水 常规细胞学检查 88% 84% DNA定量分析 100% 92% 细胞DNA定量分析的其它用途 使用细胞DNA定量分析对消化道、泌尿道、口腔及咽喉的脱落细胞进行肿瘤的诊断也已经获得令人满意的结果 乳腺包块和甲状腺包块的细针穿刺物也是DNA定量分析的合适标本 核酸检测技术 基本概念 定义：通过检测与疾病相关的DNA或RNA来检测和诊断疾病 简史：核酸检测技术是分子诊断领域中的重要组成部分，经历了前多聚酶链（PCR）期，PCR期和后PCR期。 核酸技术的发展过程 分期 时段 主要技术平台 前PCR期 1976-1985 核酸杂交技术 PCR期 1985-1995 PCR扩增技术 后PCR期 1995-今 DNA芯片等高通量技术 最活跃的几大领域： 传染病和感染性疾病 各种病原的检测、耐药基因检测及分子流行病学调查 血液病学和肿瘤学 早期诊断、确诊、转移和复发的监测，预警，预后推测、耐药基因推测及化疗效果评估等 遗传病 家谱分析、诊断及遗传趋势分析等 鉴定试验 亲缘鉴定、移植物抗宿主免疫反应监测，刑事证据学等。 多聚酶链反应—PCR 基本原理：多聚酶链反应是一项根据DNA互补原理，使用耐热DNA聚合酶催化由引物起始链延长反应而复制新DNA分子的体外核酸扩增技术。PCR反应的精髓是在短时间内扩增出大量的特定DNA片片断。 ３０个 1~3小时 扩增 循环 十亿个扩增产物 PCR的使用引起病原学检测的一场革命： 引起人类感染的病原仅有5%可以通过人工培养等常规方法进行检测 以PCR和杂交技术为代表的分子诊断技术有望检测其它95%的感染病原 PCR是目前检测感染病原的最敏感技术 人类乳头状瘤病毒的检测 人类乳头状瘤病毒 人类乳头状瘤病毒（Human papillomavirus, HPV）是一组包括100余个亚型的DNA病毒，很多亚型与皮肤粘膜的良性及恶性病变有关。在人类生殖道已经分离和鉴定出40余个亚型，其中至少有15个亚型被确定与宫颈癌密切