新型IPG胶条使用说明书.pdf

上海伯楷安生物科技有限公司 IPG 胶条使用说明 IPG 胶 条 使 用 说 明 版本 上海伯楷安生物科技有限公司 Shanghai BioChemAn Biotechnology Co.,Ltd. 第 1 页 /共 7 页 上海伯楷安生物科技有限公司 IPG 胶条使用说明 一、产品介绍 本公司隆重推出各种类型高速高分辨IPG 预制胶条，主要用于经典二维蛋白质电泳。 主要特点：  聚焦时间缩短：高速 IPG 预制胶条比同类产品聚焦时间缩短1/3。  全面兼容：可以与众多公司的电泳装置联用。  重复可靠：精确的灌注程序保证不同批次的pH 梯度的重现性。  重现性好：每盒包装含12 根胶条，均来自同一批产品。  规格齐全：胶条品种多，规格全，基本覆盖了实验中常用的pH 范围和长度范围。  保质期长：-20℃保存12 个月。 注：本系列IPG 胶条配合伯楷安两性电解质使用效果最佳。 （图1） （图2 ） 二、使用说明 操作步骤 第一向，等电聚焦水化上样 1. 本操作步骤采取被动水化方式或主动方式加样。 2. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的合适的水化上样缓冲液（不含DTT ，不含载体两性电解质） 一管（1 ml/管），置室温溶解。 3. 从冰箱取出 -20 ℃ 冷冻保存的 IPG 预制胶条，于室温放置 10 分钟。在小管中加入 0.01 g DTT，与胶条对应PH值范围的40%两性电解质，充分混匀。按照水化上样缓冲液:蛋白质 样品 = 4:1 （体积比）配制上样液并充分混匀。 第 2 页 /共 7 页 上海伯楷安生物科技有限公司 IPG 胶条使用说明 4. 沿着聚焦盘或水化盘中槽的边缘至左而右线性加入样品。注意：在槽两端各 1 cm 左右不 要加样，样品分布一定要均匀连贯，不要产生气泡。否则会影响到胶条中蛋白质的分布。 5. 用镊子轻轻去除 IPG 胶条上的保护层 （图3 ）。 （图3 ） 6. 分清正负极，轻轻将 IPG 胶条胶面朝下置于聚焦盘或水化盘中样品溶液上，使得胶条的 标记端对应于聚焦盘的正极，确保胶条与电极紧密接触。注意：不要使样品溶液弄到胶条 背面的塑料支撑膜上，这样的溶液不会被胶条吸收；不使胶条下面的溶液产生气泡。如果 已经产生气泡，用镊子轻轻地提起胶条的一端，上下移动胶条，直到气泡被赶出胶条以外。 7. 作为防止缓冲液蒸发的预防措施，矿物油必须缓缓地加在每个槽内，确保完全的覆盖住每 一根胶条。 等电聚焦程序设置 1. 7 cm胶条： S1 250 V 线性 30分钟 S2 500 V 快速 30分钟 S3 4000 V 线性 3小时 S4 4000 V 快速 20000 Volt Hr S5 500 V 快速 任意时间 2. 11 cm胶条： S1 250 V 线性 30分钟 S2 500 V 快速 30分钟 S3 8000 V 线性 4小时 S4 8000 V 快速 40000 Volt Hr S5 500 V 快速 任意时间 3. 13 cm胶条： S1 250 V 线性 30分钟 S2 500 V 快速 30分钟