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金属微电极等效电路图 金属微电极测量细胞电位等效电路图: Rfa,Cωa为电极尖端与细胞内液界面的等效阻抗 E(t)细胞膜电位; Ea电极尖端与组织电解液间电位; Eb参考电极和电介质间电位 电极金属杆与细胞外液间由绝缘层隔开,存在分布电容Cd,总电容C = ΣCd 金属微电极是一种除尖端外,其余部分用漆或玻璃绝缘的高强度金属细针。金属包括不锈钢,铂铱合金和碳化钨等。微电极很细的尖端通常用电解腐蚀法制作 等效电路看出,金属微电极等效阻抗与频率有关。一般在几兆欧到几十兆欧,在连到电极的放大器输入阻抗不是足够大的情况下,将造成波形的低频失真,通常用金属微电极获得细胞动作电位。 金属微电极电路图 电极尖端与细胞内液间的阻抗 细胞膜电位 细胞内阻液电阻 电极尖端与组织液间的电位 参考电极与电解质电位 参考电极与细胞 外液间的阻抗 细胞内阻液电阻 玻璃微电极 玻璃微电极又称微量吸管电极, 用玻璃毛细管制作,加热拉长毛细管,使缩颈处截断成为直径1μm的微量吸管结构 微量吸管中充满电解液,通常为3mol/l的 KCl,再插入Ag/AgCl电极丝,然后加盖密封,配上参考电极。 Rt:电极阻抗 集总电容C=ΣCd E(t)细胞膜电位,Ea:电极金属与电解液间电位,Eb:参考电极和电介质间电位,Ej:尖端电位,Et:电极腔玻璃半透膜的膜电位 特性:高阻电阻和并联电容存在,使电极对快速变化的细胞动作电位频响特性变坏。动作电位高频部分被电容旁路。造成波形失真。 常采用正反馈产生负电容补偿的方法减小C 的有效值。 用一个实际例子说明一般玻璃微电极的频响特性 玻璃微电极电极头直径 d1 =1.5μm; 电极头腔内直径 d2 =1.0μm;颈长 L= 3mm ; 电解液电阻率ρ = 2.0Ω·cm ;玻璃的相对介电常数 ε= 1.82; ε0 = 8.85×10-12 F/m,则电极的阻抗 电极的颈部用同轴圆筒电容来近似,则电容: 得到频率响应的最高限 而有的细胞内电位的频率成分可高达10KHz,所以须设法减少C的值。 玻璃微电极的负电容补偿电路: 正反馈方法,负电容补偿。 左边虚线部分:玻璃微电极等效电路, 微电极阻抗Rt为高阻(大于50MΩ)使得输入回路时间常数很大。 负电容补偿电路: 目的是引入负电容减少电容C,使输入电路时间常数减小,高频特性改善。 放大器为同相运算放大器,调节增益,从电位器W抽头引入Cf到输入端,形成正反馈电路。 同相运算放大器增益为K, 反馈增益K可以由电位器W任意调节。 如果引入电容Cf以前,电容C的充电电流为 反馈电容Cf的电流为 调节反馈增益K‘使满足 流过电容C的电流为零,C完全被电容Cf等效负电容抵消。 理论上微电极等效电路没有电容,时间常数变为零,容许高频信号通过。 实际补偿效果:从输出波形观测。 补偿不足:波形上升沿平缓(a), 补偿过头:波形上升沿过冲振荡(b), 最佳补偿:(c)无失真矩形波。 a)欠补偿 (b)过补偿 (c)最佳补偿 小结 1)电极组成:金属材料+电解质溶液形成的换能界面 2)原理:利用电极电位(电流)随 电解质离子浓度而变化。 3)电极电位确定的 Nernst 方程 4)极化现象 5) 极化电极和非极化电极的定义和使用 6) Ag/AgCl电极工作原理和特点 思考题: 3.1 电极的定义是什么?为什么电极可以测量生物电信号? 3.2 什么是位移电流?如何解释电极回路的工作电流? 3.3 何为电极的极化现象?极化电极使用时应注意什么? 3.4 Ag/AgCl电极属于什么电极,为什么说Ag/AgCl电极非常适合生物电测量? 解释 当系统处于平衡状态,溶液中NaCl浓度分布是各处均匀的。 电池E电压加到电极上,电极有电流通过,阴极(右)上发生电极反应为: 由于产物不能扩散离开,阴极吸附氢气,成为氢电极,电极附近OH- 浓度增加。 在阳极(左)上发生电极反应为: 产物不能扩散离开,致使阳极吸附氧气成为氧电极。电极附近H+浓度增加。 由于极化,氧电极的银电极(左)对外电路为正, 而为氢电极的银电极(右)对外电路为负, 其极性恰与外接电池E相反。阻止进一步极化 电极极化对使用的影响 电刺激:是电流通过电极反应将电子转换成离子传送到生物体内,然后经过组织器官在另一电极界面,将离子转换成电子而进入电极。 电刺激目的是将电流通过电极送入生物组织器官。 电极极化会阻碍电流进入生物体组织器官。应尽量设法减小电极极化。 生物电位测定:是通过电极把待测部位的生物电位引到检测系统进行测定。 电极极
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