生物实验探究类：DNA的分离、PCR技术和血红蛋白的提取.pptVIP

结束放映 返回目录 第*页 结束放映 返回目录 第*页 结束放映 返回目录 第*页 * 考情分析 DNA的粗提取、血红蛋白的分离 本部分内容以DNA的粗提取考查较多PCR技术和蛋白质的分离较少考查。DNA的粗提取要注意实验材料的选择，实验步骤。 * 典例剖析 答案：(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响　(2)DNA断裂　(3)①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多　②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢 【例1】某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动，步骤如下： 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10 g。剪碎后分成两组，一组置于20 ℃、另一组置于－20 ℃条件下保存24 h。 DNA粗提取：第一步：研磨、过滤，取滤液备用。 第二步：先向滤液中加入冷酒精，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。 第三步：用2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。 DNA检测：向试管中各加入4 mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却 后比较溶液的颜色深浅， 结果如表。 分析上述实验过程，回答下列问题： (1)该探究性实验的课题名称是________。 (2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少______________________________________________________________。 答案/显隐 材料保存温度 花菜 辣椒 蒜黄 20 ℃ ＋＋ ＋ ＋＋＋ －20℃ ＋＋＋ ＋＋ ＋＋＋＋ (3)根据实验结果，得出结论并分析。 ①结论1：在－20 ℃下保存，比20 ℃时DNA的提取量较多。 结论2：__________________________________________________。 ②针对结论1，请提出合理的解释：___________________________。 总结归纳 实验中相关注意问题 (1)做该实验时，不能用猪血代替鸡血，因为哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核，不能提取DNA。 (2)制备鸡血细胞液时，要注意向鸡血中加柠檬酸钠，防止血液凝固。 (3)涨破细胞的方法：向血细胞中加入蒸馏水，血细胞溶液的浓度大于蒸馏水的浓度，从而使血细胞大量吸水而涨破。不能用生理盐水，因为血细胞溶液的浓度与生理盐水的浓度相当，所以血细胞在生理盐水中不能吸收水分。 (4)两次加入蒸馏水，第一次是为了使血细胞吸水涨破；第二次是为了降低氯化钠的浓度，有利于DNA的析出。 (5)两次析出DNA的方法：第一次是加入蒸馏水，降低氯化钠的浓度，促使DNA析出；第二次是加入冷酒精，因为DNA不溶于酒精溶液。 * 变式训练 在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是(　　)。 A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物 B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质 C．将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色 D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同 解析答案 用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L时，滤取析出物；将丝状物溶解在0.015 mol/L的NaCl中，加入二苯胺试剂，需沸水浴加热几分钟，才呈蓝色；用菜花替代鸡血为实验材料，需要对材料的细胞壁进行处理。 答案：B * 典例剖析 提纯血红蛋白分四步：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析，其中分离提纯的血红蛋白时用凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质量大的蛋白质移动速度较快。答案：D 【例2】以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是(　)。 A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂 B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少 C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D．在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢 解析/显隐 总结归纳 分离DNA、PCR技术、分离蛋白质的比较 分离 PCR 分离蛋白质 实验原理 DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精 利用DNA热变性原理体外扩增DNA 依据相对分子质量的大小不同来分离蛋白质 实验过程 选取材料―→破碎细胞释放DNA―→除杂―→DNA析出与鉴定 变性―→复性―→延伸 样品处理―→凝胶色谱操作 实验结果 获得较纯净的DNA 获得大量DNA 相对分子质量不同的蛋白质得以分离 实验意义 为DNA研究打下基础 解决了DNA研究中材料不足的问题 为蛋白质的研究和利用提供了原材料 * 变式训练 红细胞中含有大量的血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或