高中生物选修3-基因工程的最基本操作程序.ppt

§1.2 基因工程的基本操作程序;补：原核细胞的基因结构;与RNA聚合酶结合位点;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;真核细胞的基因结构;真核细胞的 基因结构;非编码区;;一、目的基因的获取;(一)从基因文库中获取目的基因;;2.基因文库的构建方法;②反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。;求异思维 ;③根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ：;上述三种目的基因提取的方法有何优缺点？;(二)利用PCR技术扩增目的基因;① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ;b、PCR（聚合酶链式反应）技术扩增;⑥过程：;二、基因表达载体的构建;1.用一定的_________切割 质粒，使其出现一个切 口，露出____________。 2.用_____________切断目 的基因，使其产生_____ ____________。;质粒;5.基因表达载体的组成：;(三)将目的基因导入受体细胞;根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，你能 分析出农杆菌不能将目的基因导入单子叶植物的原因吗？ 若想将一个抗病基因导入单子叶植物，如小麦，从理论 上说，你应该如何做？;(四)目的基因的检测与鉴定;;四、目的基因的检测和鉴定;四、目的基因的检测和鉴定;1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来;2）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶;3）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;思考与探究;2、利用大肠杆菌可以生产出人的胰岛素，联系前面有???细胞 器功能的知识，结合基因工程操作程序的基本思路，思考一下 ，若要生产人的糖蛋白，可以用大肠杆菌吗？ ;（3）将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有四环 素的培养基上培养大肠杆菌肠杆菌。如果表达载体未进入大肠 杆菌中，大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉；如果培养 基上长出大肠杆菌菌落，则表明β-珠蛋白基因已进入其中。;