比浊法羧甲基壳聚糖抑菌性能的研究.pdfVIP

维普资讯 第 l0卷 第3期 滁 州 学 院 学 报 Vo1．10 No．3 2008年 5月 J0URNALOrCHUZHOUUNⅣER5rI’1『 Mav．2008 比浊法羧甲基壳聚糖抑菌性能的研究 苏 云 刘克忠 孙艳辉 王 果 (滁州学院 教务处，安徽 滁州 241ooo) 摘 要 ：：以羧 甲基壳聚糖为抑菌剂 ，研究了不 同浓度 ，不同取代度和不 同分子量的羧 甲基壳聚糖对三种细菌 的抑菌作用 ，并与苯甲酸钠配 比进行抑菌试验．结果表明：随着浓度 的增大抑菌效果 明显增大 ；取代度 的增加抑 菌效果随之减小；当分子量在 10。6xl04左右时吸光值最小，达到最好 的抑菌效果。 中图分类号：Q93 文献标识码：A 文章编号：1673—1794(2008)03-0096—03 作者简介：苏云 (198l一)，男，安徽黄山人，硕士，滁州学院教务处． 大肠杆菌．枯草杆菌和金黄色葡萄球菌是自然界普遍存在的常见细菌，也是食品中常见的细菌，对人体 危害较大，羧甲基壳聚糖对大肠杆菌具有一定抑菌活性p-21．食品中常用的防腐剂有苯甲酸钠．山梨酸钠嗍等． 对人体都具有一定的危害性 ．壳聚糖也可作为食品防腐剂 ，但是其水溶性不好，限制了它的应用，而羧甲基壳 聚糖不仅具有防腐性能，而且还具有很好的水溶性．以往一般利用平板菌落计数法来测定壳聚糖的抗菌性 能，往往技术比较复杂，本文利用分光光度计，通过测定细菌培养液的吸光度来确定羧甲基壳聚糖的抗菌性 能，此方法的优点在于简便 、准确 ，可操作性强． 1材料与方法 1．1材料 (1)菌株：大肠杆菌，枯草杆菌和金黄色葡萄球菌为安徽工程科技学院实验室提供．(2)培养基 ：牛肉膏蛋白 胨液体培养基．(3)试验仪器：净化工作台(蚌埠净化设备厂)；721型分光光度计(上海精密科学仪器有限公 司)；BS—lEA数显振荡培养箱 (金坛市杰瑞尔电器有限公司)；FC一104型电子天平 (上海精密科学仪器有限公 司天平仪器厂)． 1．2方法 1．2．1不同浓度的羧 甲基壳聚糖的抑菌实验 取5个无菌三角瓶，编号为 1～5号，配制不同浓度的羧 甲基壳聚糖的溶液，每号瓶中加入稀释的羧甲基 壳聚糖的药液4mL。并加入液体培养基25mL．再取～个空白三角瓶作对比，即不加羧甲基壳聚糖的溶液的空 白液体培养基．灭菌后，分别吸取菌悬液 1．0mL依次放入上述 6个三角瓶 中，再放入 37~C的振荡培养箱培养 24h．培养后的溶液，在波长为430nm下，用721一型分光光度计来测定溶液的吸光度，记录相关数据． 1．2。2不同取代度的羧 甲基壳聚糖的抑菌实验 取 5个无菌三角瓶，编号为6～10号，称取约 1．0g左右的不同取代度的羧甲基壳聚糖依次放在6-10号 瓶中。并加入液体培养基25mL．再做～个不加产品的空白培养基作对比．灭菌后，分别吸取菌悬液 1．OraL依次 放入64~瓶中，再放入 37E的振荡培养箱培养24h．培养后的溶液，在波长为430nm下 ，用721一型分光光 收稿日期：2008-03—11 — 96 — 维普资讯 度计来测定溶液的吸光度 ，记录相关数据． 1．2．3不同分子量的羧 甲基壳聚糖的抑茵实验 取5个无菌三角瓶，编号为 l115号 称取约 1．0g左右的不同分子量的羧甲基壳聚糖依次放在 11-15 号瓶中，并加入液体培养基 25mL一再做一个不加产品的空白培养基作对 比一灭菌后 ，分别吸取菌悬液 1．0mL 依次放入6个三角瓶中，再放入 37~C的振荡培养箱培养24h一培养后的溶液 ，在波长为 430rim下，用721一型 分光光度计来测定溶液的吸光度 ，记录相关数据． 1．2．4不同配比抗菌剂的抑菌实验 研究苯甲酸钠和壳聚糖、羧甲基壳聚糖的不同配比进行抑菌实验 ，从而比较它们的抑菌性能．其 中三者 物质的浓度都分别