产角蛋白酶植物内生菌的筛选与鉴定-河南农业科学.PDF

230 2011, Vol. 32, No. 17 食品科学 ※生物工程 杜永新，生吉萍，程凡升，王正荣，申 琳 * ( 中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京 100083) 　　 以不同植物的内生菌为出发菌株进行产角蛋白酶菌株的筛选，通过脱脂牛奶平板、高压蒸煮后的羽毛摇 瓶实验及未经处理鸡毛摇瓶实验筛选到一株能够在 48h 内降解未经高压蒸煮的鸡毛的内生菌，该菌株来源于樟树叶 片。通过形态学观察、生理生化实验结合 16S rDNA 基因序列分析的方法确定该菌株为蜡样芽孢杆菌，命名为 Bacillus cereus Z-3 。以不同的角蛋白为底物进行发酵培养，酶活力测定结果显示该酶降解角蛋白能力由强到弱的 顺序为鸡毛、羊毛、头发。 植物内生菌；角蛋白酶；蜡样芽孢杆菌；筛选；鉴定 Screening and Identification of Keratinase-producing Endophyte DU Yong-xin ，SHENG Ji-ping，CHENG Fan-sheng ，WANG Zheng-rong ，SHEN Lin* (College of Food Science and Nutritional Engineering, China Agricultural University, Beijing 100083, China) Abstract ： A strain that can degrade native feather in 48 h was isolated from camphor endophytes through primary screening on skim milk plates and secondary screening based on degradation of steamed chicken feather and native chicken feather after liquid shake flask cultivation. The isolated strain was identified as Bacillus cereus Z-3 based on morphological observation, biochemical experiments and 16S rDNA sequence analysis. Keratinase from Bacillus cereus Z-3 had the most powerful ability to degrade chicken feather, followed by wool and hair. Key words ：endophyte ；keratinase ；Bacillus cereus ；screening ；identification 中图分类号：TS201.3 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2011)17-0230-04 角蛋白(keratin) 是一类结构纤维硬蛋白，广泛存在 品添加剂，用于改善风味和强化营养[3] 。角蛋白酶在饲 于动物皮肤、毛发、鳞片、羽毛、蹄、角、爪和 料、环境保护和制革等工业中也有广泛应用。近年来还 指甲等部位，富含半胱氨酸残基和大量的二硫键，具 发现角蛋白酶具有抗虫[4] 、降解导致疯牛病的Prion 蛋白[5] 有不溶于水和抗分解的性质，其结构稳定，不被多数 的作用。因此，研究和开发降解角蛋白的微生物资源及 蛋白酶如木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶等降解[ 1 ] 。 角蛋白酶具有重要意义。目前角蛋白酶的微生物来源主 [6]