真核生物mRNA加帽160.docVIP

5.3 真核生物RNA的合成与加工 mRNA的加工修饰包括：5’端形成帽子结构、3’端加polyA、剪接除去内含子和甲基化。 ①5’-端加帽 成熟的真核生物mRNA的5’-端有m7GPPPN结构，称为甲基鸟苷帽子。 它是在RNA三磷酸酶，mRNA鸟苷酰转移酶，mRNA（鸟嘌呤-7）甲基转移酶和mRNA（核苷-2’）甲基转移酶催化形成的。 不同的甲基化可形成3种帽子类型：0、1和2。 鸟苷以5’-5’三磷酸键与RNA的5’-端相连。当G第7位C被甲基化形成m7GPPPN时，此结构称为“帽子0”。存在于单细胞生物。 如果RNA的第1位核苷酸的2’-O位也甲基化，形成m7GPPPNm，称为“帽子1”，普遍存在； 如果RNA的第1、2位核苷酸的2’-O位均甲基化（2位必需是A），成为m7G-PPPNmNm，称为“帽子2”，此结构发生很少。 真核生物帽子结构的复杂程度与生物进化程度关系密切。 5’帽子的功能 mRNA 5’-端帽子结构是翻译起始所必要的，为核糖体识别mRNA提供了信号，并协助核糖体与mRNA结合使翻译从AUG开始。 帽子结构可增加mRNA的稳定性，保护mRNA免遭5’→3’核酸外切酶的攻击。 ②在3’-端加尾巴 大多数真核mRNA在3’-端都有约150~200nt的Poly（A）尾巴。Poly（A）尾是转录后在核内加上的。 根据Poly（A）尾巴的特点可从众多的RNA中分离mRNA。 真核基因的3’端有AATAA、YGTGTGYY（Y为嘧啶）序列，作为mRNA 3’-端加polyA尾的信号。 hnRNA链被RNaseⅢ在加尾巴信号下游11~30nt处切断磷酸二酯键，polyA聚合酶催化在3’-OH上逐一引入100~250个A。 Poly（A）尾巴的功能 防止核酸外切酶对mRNA信息序列的降解，起缓冲作用。 可能与mRNA从细胞核转送到细胞质有关。但是相当数量的没有polyA尾巴的mRNA如组蛋白mRNA，也能通过核膜进入细胞质。 Poly（A）尾巴可能对真核mRNA的翻译效率具有某种作用，使mRNA较容易被核糖体辨认。 3’-脱氧腺苷（冬虫夏草素）是多聚腺苷酸化的特异抑制剂，但它不抑制hnRNA的转录，它的存在可阻止细胞中出现新的mRNA，表明多聚腺苷酸化对mRNA的成熟是必要的。 ③mRNA甲基化 真核mRNA往往有甲基化位点，主要是在N6-甲基腺嘌呤（m6A）。这种甲基化修饰对翻译没有必要，可能在mRNA前体加工中起识别作用。 ④mRNA前体（hnRNA）的拼接 真核生物的结构基因中具有可表达活性的外显子，也含有无表达活性的内含子（断裂基因）。 内含子的数量与所在基因的大小有关。许多基因中的内含子参与基因表达调控。外显子一般大小为100～200pb，内含子＞1kb。