原创力文档- 1、本文档共11页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
精品PPT体外实验
Balb/c小鼠8周龄 动科部购买240只 分为40组，每组6只 每只小鼠提取的淋巴细胞以2×107个/ml铺于六孔板中，共2ml，适应性培养2小时后加细菌刺激 galectin9的加入：细胞铺于六孔板上即加入，2小时后再加细菌刺激 到时间点后，每孔细胞离心，上清收集行ELISA（IL-4、IL-10、IL-12、IFN-g），细胞分两部分，一部分提蛋白行WB（TLR4、MyD88），另一部分行FC（Tim-3检测） 每孔细胞离心后重悬于2mlPBS，取100ul悬液分入2个EP管内，每管50ul（细胞数约1×106个），每管加PBS至100ul，加入CD3、CD4、Tim-3三种荧光抗体→离心→重悬于300ulPBS中→送检流式 细胞保存：细胞入1ml70%酒精4℃保存，第二天再行流式检测 Balb/c小鼠 淋巴细胞提取液、1640培养液、胎牛血清、IL-2、ConA Galectin-9 PE-抗鼠Tim-3及同型对照 FITC-抗鼠CD3 PerCP-抗鼠CD4 体外实验小鼠不需要清洁级？ 小鼠越重越好，可多提淋巴细胞？不需要区别雌雄，可将所有细胞混在一起再平均分配？ 细胞同时做WB和FC，会不够吗？ 细胞保存方法可行吗？ 抗体是以上四种吗？如何设门？ 体外研究 实验动物 技术路线 淋巴细胞 未处理 galectin9 1:0 1:100 1:200 1:300 Hp 刺激 3 6 12 24 48 实验方法 流式细胞术 材料及试剂 以CD3和CD4设门，测Tim-3阳性细胞百分比 问题 * *
文档评论（0）