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胚胎注射试验计划修改稿
试验计划
试验目的:
通过胚胎注射鹅脱氧胆酸(CDCA),探讨CDCA对鸡胚骨骼肌发育的影响。
试验方案:
材料:纯种胚蛋(新兴种鸡场),CDCA(sigma),DMSO,花生油,
注射器。
分组:
分组/剂量(ng) 0 250 500 1000 E16 40 40 40 40 E21 40 40 40 40 Week1 40 40 40 40 Total 120 120 120 120 E8注射 CDCA(分子量:392.57)母液浓度:0.1μmol/μl=39.257μg/μl
配液:
组别(ng) 0 250 500 1000 母液(μl) 0 0.00637 0.01274 0.02547 × 140 0 0.89 1.78 3.57 DMSO 3.75 2.86 1.78 0 生理盐水 7ml 7ml 7ml 7ml
1、在孵化前注射一次,在E16、E21、Week1采样.
2、E8注射一次,在E16、E21、Week1采样。
每个处理组120个样本,每次采样(20-40个)。
可能在注射时出现胚胎死亡。
胚蛋从新兴种鸡场取回,需要纯种的地方品系。
溶剂:
注射液配方:①DMSO终浓度0.6%+0.7%NaCl+CDCA=50μL花生油
CDCA溶解于DMSO;
(注射DMSO会降低胚蛋孵化率30%;胚蛋重一般为60-70g)
参考剂量:美托咪定(25μg/Kg≈1.5ng/egg), 四氯二苯-p-二恶英(0-10ng/egg),氯化镉(0-24μg/egg)。
LD50致死量的确定:
相关胚胎注射的文献:
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