真菌学总论推荐.pptVIP

临床标本的采集种类 （1）皮肤的角质性物质：毛发、指（趾） 甲、皮屑等。 （2）各种分泌物和排泄物：生殖道分泌物、 耳垢、痰、粪便、尿液等。 （3）血液和体液：体液包括胸水、腹水、脑 脊液、淋巴穿刺液等。 （4）脓汁及渗出物。 * 采集标本注意事项 （1）采集的标本要适宜 不同真菌感染应采取不同的临床标 本。怀疑为浅部真菌感染如体癣，应刮取病变边缘的痂、皮屑，发癣应取折断了的病发。怀疑为深部真菌感染应取血液、脑脊液、痰、脓汁等。 （2）在用药前采集标本　一般真菌标本须在用药前采集，对已用药者则需停药一段时间后再采集标本。 * 采集标本注意事项 （3）采集的标本量要足 血液和脑脊液标本5ml，胸腔液20ml，皮屑标本两块，活体组织两份（一份送病理科检查，一份作镜检和培养）。 （4）严格无菌操作　在采集标本时严格无菌操作，并进行消毒处理，尤其是在采集血液和脑脊液标本时，要避免污染杂菌。 （5）采集的标本立即送检　对采集的标本应立即送检，特别是深部真菌标本采集后最长不超过2h。 * 真菌的检验方法 镜检真菌形态 真菌抗原检测 真菌分离培养与鉴定 真菌核酸检测 真菌毒素检测 * 真菌标本直接检查 1.直接镜检：方法简便，快速 10%KOH 微加热 低倍/高倍镜检查有无菌丝/孢子 角质标本 （皮肤癣菌） 直接观察/染色后观察 2.抗原检测: 采用免疫学方法检测真菌抗原，常用的方法有胶乳凝集试验、ELISA、半定量放射免疫测定法。 * 常用的染色方法 常用的染色方法有革兰染色、瑞氏染色、荧光染色，乳酸酚棉蓝染色、还有墨汁负染色等。 对检测骨髓和外周血中的荚膜组织胞浆菌，需作瑞氏染色或姬氏染色后镜检。 检测病人脑脊液标本中新生隐球菌，需作墨汁负染色后检查，背景为黑色，新生隐球菌和荚膜不着色 * 直接镜检意义 阳性结果意义 1.有诊断意义，如浅部真菌病、隐球菌病、皮肤粘膜假丝酵母菌病等 2.代表组织相，直接镜检看到的真菌形态就是该真菌的组织形态，如假丝酵母的菌丝、浅部真菌的厚膜孢子等；确定某些致病性真菌属或种，如皮肤癣菌、曲霉等 3.判断某些真菌种的致病性等 * 直接镜检意义 直接镜检局限性 1.阴性结果不能排除真菌感染，直接镜检不如培养敏感，其敏感性随标本类型、数量、采集时间和质量等而有所不同 2.有假阳性结果，如溶解的淋巴细胞在脑脊液印度墨汁湿片中易误认为新生隐球菌；脂肪微滴也可与出芽酵母细胞混淆 * 分 离 培 养 真菌培养是目前鉴定真菌的唯一方法。 培养成功与否与采集的标本是否适当、是否新鲜、培养基的选择、培养温度与时间等有关。 大多数真菌培养的温度为28℃，但深部真菌为37℃。对二相性真菌培养时,28℃培养真菌呈菌丝相（霉菌型），37℃培养为组织相（酵母型）。 * 真菌培养方法 平皿培养 :表面较大可使标本散布，便于观察菌落形态，但水分易蒸发，只能培养生长繁殖较快的真菌，如假丝酵母菌、隐球菌。 大试管培养:水分不易蒸发，主要用于皮肤癣菌的培养和真菌菌种的保存。 玻片培养(微量培养、小培养):可用于真菌菌种的鉴定。 * 观察菌落形态时注意 1.菌落性质，是酵母菌还是霉菌。 2.菌落大小,一般病原性真菌菌落小，而条件致病性真菌菌落大。 3.菌落颜色，一般病原性真菌颜色淡，污染真菌颜色深。 4.致病性真菌菌落下沉，污染性真菌菌落不下沉;致病性真菌有时使培养基开裂，但污染霉菌很少引起培养基开裂。 * 真 菌 鉴 定 菌种鉴定是一个复杂过程，仅观察菌落形态是远远不够的，还需作生化反应，分子生物学鉴定，必要时将菌种送有关单位鉴定。 检验真菌常用的生化反应有糖(醇)类发酵试验、同化碳源试验、同化氮源试验或利用硝酸钾试验、牛乳分解试验、酚氧化酶试验、明胶液化试验和脲酶试验等。试验方法同细菌试验，主要用于检验深部感染真菌如假丝酵母菌、隐球菌等。 * 1.多烯类抗生素，如两性霉素B、制霉菌素、曲古霉素等。 2.吡咯类，包括酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑、克霉唑、益康唑等。 3.其他类如氟胞嘧啶。 抗真菌药物分类--化学结构分类 * 1.作用于真菌细胞膜：两性霉素B、制霉菌素、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、酮康唑及克霉唑等。 2.作用于真菌细胞壁：尼可霉素Z、卡泊芬净及普拉米星（pradimicin）等。 3.作用于真菌核酸：干扰真菌DNA合成，5－氟尿嘧啶（5－FC）等。 4.其他：大蒜新素（allitridum）及冰醋酸（glaciale acetic acid）等。 抗真菌药物分类--作用机理分类 * 1．两性霉素B 两性霉素对大多数深部致病真菌具有活性， 如念珠菌、新型隐球菌、曲菌、组织