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一代测序峰图及报告解读 付辉玲 fuhuiling@ DNA测序技术 DNA测序技术，即基因测序技术，是指测定DNA序列的技术。 DNA测序的目的是得到特定基因的特定区域上序列信息——A、T、G、C四种碱基的排列顺序。一些疾病的发生机理在于某些区域的碱基排列发生了变化，与正常人不一致—基因突变，从而导致了疾病的发生。 一代测序 一代测序是DNA测序技术的一种， 技术原理：双脱氧末端终止法（Sanger法）+毛细管电泳（CE）； 特点：读长较长长700-800bp；检测通量中等；检测灵敏度低；适用于少数基因的少量位点测序； 用于研究和临床检测 标本收取处理 测序反应原理：双脱氧末端终止法（Sanger法） 由于双脱氧单核苷酸缺乏延伸所需要的3-OH基团，一旦掺入到DNA链中，DNA链就不能进一步延长。 每当DNA聚合酶需要dNTP参入到正常延长的DNA链中时，就有两种可能性，一是掺入ddNTP，结果导致DNA链延长的终止；二是掺入dNTP，使DNA链仍可继续延长，直至掺入下一个ddNTP。 可得到一组长短不一的链终止产物，彼此只相差一个碱基。它们有共同的起始点，但终止在不同的荧光标记的ddNTP上。 通过高分辨电泳对这一组产物进行分离，光学系统捕捉到ddNTP的荧光信号，以峰的形式展现成图谱，并按顺序排列。从电泳图谱上可读得DNA碱基序列。 测序结果分析 参考序列 样本序列 TC T突变为C 测序检测报告 感谢各位的聆听！