中国医学高校创新性机能实验设计大赛一等奖作品_神经干动作电位不应期的定量分析_沈建新江玲20170719.pdfVIP

 实验题目 神经干动作电位不应期的定量分析  实验目的 1、熟练掌握常规坐骨神经干标本的制备 2 、理解并掌握确定神经干动作电位最适刺激强度的方法 3、理解并掌握神经干动作电位不应期定量分析的实验设计原理 4 、理解并掌握神经干动作电位不应期定量分析的数据采集方案及数据的处 理分析流程 5、较准确获得神经干动作电位不应期的真正定量分析结果  实验仪器 1、蛙类常用手术器械和相关物品一套：包括大方盘，蛙板，粗剪刀，眼科 剪，止血钳，小镊子，有齿镊子，毁髓针，玻璃分针，锌铜弓；肾形盘，培养皿， 滴管，槽钉，尺子，丝线；小饭盆，小烧杯；任氏液，手套等。（图 1 和图 2 ） 图1. 神经干动作电位不应期的定量分析实验场景全景图 图2. 神经干动作电位不应期的定量分析之手术器械和相关物品实物图 2 、神经干标本屏蔽盒： 至少包括5根电极，具体为刺激电极两根S1 （+ ） 和S2 （- ），接地电极一根E, 记录电极两根R1 （记录电极）和R2 （参比电极）。 （图3 ） 图3. 神经干标本屏蔽盒电极连接示意图 （左）和实物图（右）：S1为刺激 电极正极，S2为刺激电极负极，E为接地电极，R1为记录电极，R2为参比电极， Ch1表示信号输入的第一通道。 3、多媒体电脑一套：普通配置即可 4、生物机能实验系统一套 （本实验设计使用的是BL-420F ）: 包括软件系 统和输入输出盒，前者安装于电脑中，后者含电源线、与电脑连接的 USB 线、 与神经标本盒的信号连接线（一端可与生物机能实验系统的输入通道孔相接；另 一端与神经标本盒的电极相接, 共有三个接头：外包屏蔽网和地线接头（黑色接 头），中间是信号输入的正负极两根导线和两个接头（白色和红色接头），分别 与两根记录电极 R1 和 R2 相接）和刺激线（一端可与生物机能实验系统的刺激 输出孔相接；另一端共有两个接头， 分正负极，可与神经标本盒的刺激电极 S1 和 S2 相接，靠近记录电极一侧为负极）各一根。（图 4 ） 图4. 神经标本盒与生物机能实验系统的连接实物图 5、Office 软件一套: 2003 版或更高版本，其中的 EXCEL 可启用宏编程功能。  实验动物（描述手术过程） 青蛙（或蟾蜍）一只，按常规方法制备坐骨神经干标本，简要过程如下： 1、动物抓拿与清洗 （在水龙头下进行清洗，可用纱布包裹上肢以下躯干部 位，有利于抓拿时防滑）； 2 、找准枕骨大孔（图5）并将毁髓探针刺入椎管 （可用食指控制毁髓探针 刺入深度，防止穿过椎骨）； 图5. 蛙枕骨大孔位置示意图 3、横断脑和脊髓连接处 （探针尖端轻贴椎管腔腹侧，左右划几下即可）； 4、捣毁脑 （探针在椎管内向头端伸入颅腔反复搅动几下即可）； 5、捣毁脊髓 （探针在椎管内向尾端伸入椎管腔反复搅动几下即可；一般可 见蛙的两个后肢突然完全绷直，之后完全松软，此为毁髓成功的典型标志）； 6、髂关节以上约1cm处剪断脊柱 （抓握两个后肢，用粗剪刀适当用力剪断）； 7、去除上部躯干和内脏 （抓握两个后肢，利用重力使上部躯干和内脏自然 下垂，用粗剪刀剪去，注意不要伤到腹腔段的坐骨神经）； 8、剥去下肢皮肤 （一手用止血钳避开皮肤横向夹住脊柱断端边缘；另一手 则用有齿镊或纱布辅助抓住皮肤断端；双手上下反向适当用力，可褪去下肢皮 肤）； 9、剪去尾杆骨 （用粗剪刀贴着骨头剪，方便下一步一分为二的操作）； 10、将余下的标本分成左右两半 （用粗剪刀中间剪开，可分成左右两半， 后续可制备成两个坐骨神经干标本）； 11、腹腔段神经束的游离 （用玻璃分针顺着神经的走向划开筋膜和结缔组 织，并使神经与血管及结缔组织分开）和结扎 （用丝线和镊子在离神经干发出 的根部约0.3cm处将坐骨神经干的主干结扎在一起，只保留两个小线头便于后续 可用镊子夹取神经干标本即可）; 12、大腿段神经束的游离并与腹腔段贯通 （用玻璃分针顺