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壳雅始∞±∞Ⅻ糖R％★Hm#∞ⅧHn月ⅫA 壳聚糖衍生物对糖尿病大鼠血糖的调节作用研究 摘要 糖尿病(DM)足由于胰岛素分泌量绝对或相对不足引起．具有遗传性， 属于常见的内分泌代谢疾病之一，l播床上通常农现为慢性山糖升高和典型的“三 多少”症状。 甲壳素广泛存在于甲壳纲动物(如虾和蟹等)、昆虫的甲壳和真菌(如酵母、 霉菌等)中，是一种N一乙酰．D．葡萄糖胺的多聚糖。壳聚糖是甲壳素的脱乙酰化 产物，为白色固体，形状无定形，呈现半透明、略带珍珠光泽，是一种具有多种 生物活性的碱性多耱。对甲壳素和壳聚糖的分子结构进行修饰，得到不同结构的 水溶性壳聚糖衍生物。可使它们的性能得到改进，满足特殊需要。大分子量的壳 聚糖经过降解．可以得到分子量较低的壳聚糖产物即低聚合度壳聚糖，这类产物 较壳聚糖有更好的水溶性，并且更加利于机体吸收利用，具有更广泛的应用价值。 本论文以大分子量的壳聚糖为原材料，通过化学合成方法和生物酶降解法制 各了低脱乙酰度的低聚壳聚糖、磺酸化壳聚糖和羧甲基甲壳素，通过测定它们的 相关理化性质，了解三种壳聚糖衍生物的结构。 在动物水平上，以全雄Wistar大鼠为研究对象，通过一次性腹腔注射链脲佐 菌素建立糖尿病大鼠模型，将造模成功的大鼠随机分为正常对照组和模型对照 组，每日分别灌胃一定体积的蒸馏水：低脱乙酰度壳聚糖组(200mg／kg)、磺酸 化壳聚糖组(200m啦g)、羧甲基甲壳素组(200m卧g)，每日分别对大鼠灌胃 三种壳聚糖衍生物。连续灌胃45天后测定空腹血糖变化和糖耐量改变，同时测 定大鼠体重变化，血脂，肝脏、脾脏、肾脏和胰腺的脏器指数，对大鼠胰腺、肾 脏和肝脏进行病理组织学切片观察。 在细胞水平上，以胰岛D细胞为研究对象，三种壳聚糖衍生物为实验材料， 采用常规细胞培养方法培养R／N—m5f胰岛细胞系，壳聚糖衍生物设定5个浓度梯 度(62 h、96h、144 照组，通过M丁T法检测不同培养时间(49 h)胰岛13细胞的增殖 x 隋况，并计算细胞增殖率(proliferationrate，PR)：AIAo100％，实验重复3次。 实验结果及结沦如下： 1低脱乙酰度壳聚糖、羧甲基甲壳素、磺酸化壳聚糖的理化性质如下，水分含量 !!!!!!!!!!!!些!!!!!!! 06％、l09％、】8．736％，脱乙 分别为59％、5．47％、5,64％，扶分吉量分别为1 65％，磺酸 酰度分别为4853％、1023％、3753％；羧甲基甲壳豢的羧化度为98 3％．红外光谱删定结果显示，低脱已酰度CT8在3440 化壳聚椭的磺酸化度为88 cm。、1557cm～、1071 cm一、 cm。、1650 cm。具有特征性吸收峰：CMC在3443 1649cm。、14l7cm。、1069cm’1具有特征性吸收峰；磺酸化壳聚耱在1232cm。。、 799cm‘。处有特征哦收峰，均具有良好的水溶解性。 2糖尿病大鼠灌胃45天后，三种壳聚糖衍生物对空腹血糖均有不同的降低作用， 其中低脱乙酰度壳聚糖组和羧甲基甲壳素组的降糖效果较好，30d时出现显著 05)，45 74％ 性差异(P0 d时具有极显著性差异(P0叭)，降糖率分别为3 和488％。于45d测定其葡萄搪耐量，结果显示，三种壳聚糖衍生物组大鼠的 受损的糖耐量得到有效修复，各个时相血糖值(P0)均出现不同程度降低，其 中低脱乙酰度壳聚糖、羧甲基甲壳素组的糖耐量曲线下面积与阴性对照组比较具 OI)，且羧甲基甲壳素组效果最好。 有极显著性差异(P0