掌握用荧光法测定维生素的分析方法.pptVIP

三、实验步骤 1．标准系列溶液的配制 用吸管移取维生素B2标准贮备溶液10.00mL于100mL容量瓶中，用W为0.05的乙酸稀释至刻度，摇匀。吸取该稀释溶液(10.0mg·L-1) 0,0.50,1.00,2.00,3.00和4.00mL，分别放入六只100mL容量瓶中，用W为0.05的乙酸稀释至刻度，摇匀，此标准系列溶液的浓度分别为0,0.050,0.10,0.20,0.30和0.40 mg·L-1。 2.样品溶液制备 称取50g新鲜蔬菜，加40mL水压汁，将菜汁加入20mL1mol.L-1HCl和10mL水煮沸1h，冷却，不断搅拌滴加2mol.L-1NaOH，调节pH为6，再用稀HCl调节pH至4.5，过滤，用水洗涤样品，洗涤液和过滤液合并定量转移至100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。 3.工作曲线绘制 取标准系列溶液之一，试验实验条件，找出最佳荧光发射波长。在所确定的波长条件下测定标准系列溶液的荧光强度，绘制荧光强度与浓度的工作曲线。 4.测定 分别吸取10.00mL样品溶液三份，依次置于三只25.00mL容量瓶中，加入1.25mL冰醋酸，再加入KMnO4溶液(3%)0.5mL，放置2min，边摇边滴H2O2(30%)，使KMnO4刚好褪色，用纯水稀释至刻度，在