生物化学试验水产科学试验教学中心.doc

《 生物化学实验 》课程实验教学大纲 课程编号 学时 56 学分 3 课程的性质和任务 本课程通过学习生物化学的基本实验技术，使学生具有初步的科学实验能力及严格的科学作风，同时验证生物化学的某些基本理论知识，加深感性认识。 教学要求和方法 通过本门课程的学习，要求学生在掌握生物化学课程的基本理论和基本知识的同时学习生物化学的基本实验技能，掌握比色、纸层析、电泳、分子筛柱层析、生化制备等基本实验技术。通过学生自己动手亲自参与来实现上述教学要求。 教学内容要求 教学目的是使学生学会生化常用的仪器设备，培养学生的动手能力和解决实际问题的能力。 考试方式及方法 平时成绩和考查相结合。 配套的实验教材或指导书 生化教研组2000年自编 ?生物化学实验? 适用专业 渔业学院生物技术 实验项目 序号 实验内容 学时 实验类型 实验类别 实验要求 每组人数 1 氨基氮测定—甲醛滴定法 3 综合型 技术基础实验 必修 2 2 蛋白质浓度测定—Folin-酚法，紫外吸收法及其比较 6 综合型 技术基础实验 必修 2 3 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳 3 综合型 技术基础实验 必修 2 4 总糖和还原糖测定—3，5-二硝基水杨酸法 4 综合型 技术基础实验 必修 2 5 酶的专一性 3 验证型 技术基础实验 必修 2 6 蛋白酶的活力测定 4 综合型 技术基础实验 必修 2 7 酵母核糖核酸（RNA）的提取制备 4 综合型 技术基础实验 必修 2 8 葡聚糖凝胶层析 3 综合型 技术基础实验 必修 2 9 氨基移换反应 6 综合型 技术基础实验 必修 2 10 蛋白质的提取制备和活力测定 10 综合型 技术基础实验 必修 2 11 过氧化物酶同工酶聚丙烯酰氨凝胶电泳 10 综合型 技术基础实验 必修 2 12 底物浓度对酶活性的影响—蔗糖酶米式常数的测定 6 综合型 技术基础实验 必修 13 氨基酸的分离鉴定—纸层析法 3 综合型 技术基础实验 必修 实验一 氨基氮测定—甲醛滴定法 （一） 实验目的： 掌握氨基酸的两性离子性质，以次法定量蛋白质发酵食品氨基定氮的含量。 （二） 实验项目内容： 1．样品测定 2．计算样品氨基氮含量 主要仪器设备及配套数 1.仪器：吸量管5ml，10ml；量杯10ml；三角瓶；酸度计 2.试剂：甲醛溶液；0.01N氢氧化钠　　　　　 实验室名称： 生化实验室 实验二 蛋白质浓度测定——Folin一酚法，紫外吸收法及其比较 （一） 实验目的： 1. 学习Folin－酚法测定蛋白质含量的原理和方法。 2. 进一步掌握比色法或分光光度法，确定最大吸收波长、制作标准曲线、准确使用测定仪器等。 （二） 实验项目内容： 　　　 1. Folin—酚法中标准曲线的绘制 　　　　　2. Folin—酚法中样品液的测定 3 . 紫外吸收法中标准曲线的绘制 4 . 紫外吸收法中样品液的测定 （三） 主要仪器设备及配套数： 　　　　　1. 仪器：吸量管（0.5、1.05ml）与吸量管架；试管与试管架；分光光度计；紫外分光光度计 　　　　　2. 试剂：Folin一酚试剂A；Folin一酚试剂B；各蛋白标准溶液（400ｕ1.掌握还原糖和总糖的测定原理　　 　　　　　　　2.学习用比色法测定还原糖的方法 　　（二）实验项目内容 　　　　　　　1. 葡萄糖标准曲线的制作 　　　　　　　2. 样品中还氧糖和总糖的测定 （三）主要仪器设备及配套数： 　　　　 主要仪器：容量瓶，玻璃漏斗,　吸管, 量筒,721型分光光度计，电热恒温水浴锅，水浴锅 　　　　　 配套数：10套　　　　 （四）实验室名称： 生物化学实验室 实验五　　酶的专一性，温度、PH、 激活剂、抑制剂对酶活性的影响 （一） 实验目的： 1．了解酶的特异性 2．掌握检查酶的特异性的方法及其原理 3．通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性，了解温度对酶活性的影响 4．了解pH对酶活性的影响 5．学习测定酶的最适pH的方法 6．了解酶促反应的激活与抑制 7．学会检定激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理 （二）实验内容： 1．温度对酶活力的影响 2．pH对酶活力的影响 3．活