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1、植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。又称为植物离体培养。 2、无菌：是指使培养皿、器械、培养基和培养材料等处于无真菌、细菌、病毒等微生物的状态，以保证培养材料在培养器皿中正常生长发育。 3、外植体：植物组织培养中，使用的各种器官、组织和细胞统称为外植体。 4、愈伤组织：是指外植体因受伤或在离体培养时，其未分化的细胞和已分化的细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。 5、组织培养的特点 （1）整个过程无菌 （2）多数利用成分完全确定的人工培养基，植物材料处于异养 （3）培养材料可以是器官、组织、细胞，处于离体状态，在不同水平表现细胞全能性 （4）可形成克隆，或达到其他目的 （5）在封闭容器中进行 （6）环境温度、光照都是人为设定 6、组织培养的研究类型（1）组织培养（2）器官培养（3）胚胎培养（4）细胞培养（5）原生质体培养 7、植物组织培养的应用 植物离体繁殖 无病毒苗木培育 培育新品种或创制新物种 次生代谢物生产 植物种质资源的离体保存 人工种子 8、培养基的构成 （1）水分 （2）无机盐类 铁盐 （3）有机营养（糖、维生素、氨基酸） （4）植物生长调节剂 生长素：IAA IBA NAA 2,4-D 细胞分裂素：KT ZT 6-BA TDZ 2-ip （5）天然有机添加物 （6）pH（5.0-6.0） （7）凝固剂（琼脂） 9、培养基的基本类型 （1）含盐量较高的培养基：其代表是MS培养基。无机盐浓度高，特别是硝酸盐、钾离子和铵离子含量丰富；元素平衡较好，缓冲性能好；微量元素和有机成分含量齐全且较丰富。 （2）硝酸钾含量较高培养基：培养基的盐浓度高，铵态氮含量较低，但盐酸硫胺素和硝酸钾含量较高。 （3）中等无机盐含量的培养基：大量元素含量约为MS培养基的一半，微量元素种类少但含量较高，维生素种类较多。 （4）低无机盐含量的培养基：无机盐含量非常低，为MS培养基的1/4左右，有机成分也很低。 10、外植体的选择原则 再生能力强 遗传稳定性好 外植体来源丰富 外植体灭菌容易 11、常用的灭菌药剂 酒精 次氯酸钠 氯化汞 12、植物细胞全能性 每一个植物细胞都带有该植物的全部遗传信息，在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同类型的细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整再生植株。 13、细胞分化 是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在的发育方式改变的过程。 14、脱分化 也称去分化，是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分手状态，形成无组织结构的细胞团或成为未分化细胞特性的细胞的过程。 15、再分化 离体培养的周五细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株，这个过程称为再分化。 16、愈伤组织形成（1）诱导期（2）分裂期（3）分化期 17、愈伤组织生长过程发生的生理生化变化 （1）RNA先增加后减少 （2）同工酶谱发生变化 （3）连续继代培养可能改变次生物质的积累水平或能力 （4）可能出现驯化现象 18、胚状体 在离体培养条件下，植物离体培养的细胞、组织、器官也可以产生类似胚的结构，其形成也经历一个类似胚胎的发生和发育过程，这种类似胚的结构称为胚状体。 19、体细胞胚胎发生过程 原胚 球形胚 心形胚 鱼雷形胚 成熟胚 20、植物器官和组织培养的基本程序 （1）无菌外植体的获得 ①茎尖、茎段、叶片的灭菌 ②根、块茎、鳞茎的灭菌 ③花蕾的灭菌 ④果实、种子的灭菌 （2）初代培养物的建立无菌环境 ①规范操作 ②条件合适 （3）形态发生和植株再生 （4）培养产物的观察记载 ①愈伤组织 ②胚状体 ③芽 ④根 21、胚培养的应用： ①克服远缘杂交不亲和性 ②打破种子休眠，缩短育种周期 ③提高种子萌发率 22、胚珠培养的意义 ①使杂种尽早培养，防止杂胚早期败育，获得杂种植株 ②通过受精前胚珠培养以及未受精的胎座或子房培养，可以作为试管受精的基础 ③未受精的胚珠培养能和花药培养一样，诱导出大孢子或卵细胞增殖，形成单倍体，用于单倍体育种 23、花粉培养方式 平板培养 看护培养 液体培养 双层培养 微室培养 条件培养基培养 24、影响雄核发育的影响因素 （1）基因型 （2）植株生长条件和生理状态 （3）花粉发育时期 ①花粉粒发育时期的观察 ②花粉发育时期的确定 （4）预处理 ①高低温处理 ②化学物质处理 a高糖 b甘