磷脂微管中的相分离.pptVIP

通过磷脂膜在流动相中的水合作用可以组装得到中空磷脂微管。 对于三元磷脂混合物形成的磷脂微管，在显微镜下的光氧化作用可以促进脂筏的融合，表现为微米级的相分离。 磷脂微管中，脂筏的融合可以形成三种不同的相分离：链状微管，链状微球，以及链状脂盘。之所以形成不同的结构可能与局部组成不同以及光氧化导致的融合速率不同有关。 磷脂微盘对理解生命体中一些特殊的脂膜结构具有非常重要的意义。 小结 J. Am. Chem. Soc. 2008; 130 (6); 2067-2072. 致谢： Dr. Linda Hirst Dr. Elaine Dimasi (in BNL) Yohanes H. Pramudya Lam T. Nguyen Jennifer Kirchhoff Funding: MARTECH Institute of Molecular Biophysics (IMB) FSU Council for Research Creativity Planning grant Travel funding from NSLS in BNL NSF CAREER, DMR-0745786 磷脂双层膜中相分离研究 袁菁 两种三元磷脂混合膜中相分离研究--SAXS 磷脂微管中的光致相分离 磷脂分类 １.磷脂头基 　PC (磷脂酰胆碱, 又称卵磷脂), PE(磷脂酰乙醇胺), PS(磷脂酰丝氨酸), PI(磷脂酰肌醇), PG(磷脂酰甘油), SL(鞘磷脂)…… 烷基链 　饱和磷脂：排列致密，流动性差，相变温度高 　不饱和磷脂：排列松散，流动性好，相变温度低 外周蛋白 整合蛋白（跨膜蛋白） 脂双层 运输蛋白 通道 细胞外液 糖蛋白 外周蛋白 糖脂 胆固醇 磷脂： 极性头基 （亲水） 脂肪酸链 （疏水） 细胞溶质 细胞膜 脂筏 脂筏是磷脂膜里的一种特殊微结构域，尺寸大约10~100nm。脂筏以液态有序相分散于细胞膜中，对生物体内的信号传导，蛋白质转运，细胞膜结构以及病原体入侵等生理过程中都起着非常重要的作用。 脂筏中富含胆固醇及鞘磷脂。鞘磷脂的疏水链较长且高度饱合，与胆固醇相互作用形成一种液态有序相(lo)。 Lichtenberg, D. et. al. TRENDS in Biochemical Sciences, 2005, 30, 430 “脂筏” 三元混合膜中三种典型磷脂双层膜相结构. Munro S. cell 2003, 115, 377–388. “脂筏” 饱合磷脂 不饱合磷脂 原子力显微镜下三元混合磷脂双层膜中的相分离（纳米尺度） L. Hirst J. Yuan, Mol. Cryst. Liq. Dryst. 2009, 508, 67 “脂筏”尺寸大约为50~100nm 脂双层大囊泡（GUV）的制备及其在荧光显微镜下的相分离 10um DOPC/eSM/Cholesterol=1:1:1， 荧光标记：a)Rh-DPPE; b)NBD-DPPE 三元磷脂混合膜体系: Veatch, S. L. et. al. Phy. Rev. Lett. 2005, 94, 148101 荧光显微镜下观察到的两类三元磷脂混合膜的相图 PSM DPPC 普通饱合磷脂是否能取代鞘磷脂，形成“脂筏”？ 为什么生命体选择鞘磷脂而不是普通的饱合磷脂来形成脂筏??? 同步辐射X光小角散射 (SAXS) SAXS 数据采集于Brookhaven National Laboratory (BNL). 曝光时间: 300s 磷脂浓度: ~200 mg/ml Bragg’s 法则: d*Q=2np (Q=4psinq/l) d1 d2 d2 多重峰： 单重峰: I: 高度流动性 II. 不对称双层膜 SAXS上峰的是否裂分对应的可能的膜结构 DOPC (不饱合磷脂, 低 Tm) 胆固醇(CHO) 鞘磷脂(eSM) DPPC A: C: B: 三元磷脂混合物: A/B/C (1:1:x) （饱合磷脂, 高 Tm) O O O O O P O O N + H O - O O O O O P O O N + H O - O N H O P O O N + H O - O H H H H H O H H H 0.9 1.0 1.8 2.0 3.8 4.0 100X Q / nm -1 5X 50 33 25 20 16 12 10 8 6 5 4 3 1 0 胆固醇% 0.9 1.0 1.6 2.0 3.5 4.0 Q / nm -1 50 33 20 16 14