乳酸发酵11.ppt

乳酸发酵 乳酸,又名丙醇酸,学名α- 羟基丙酸,分子式为C3H6O3 ,其分子结构中含有一个不对称碳原子,因此具有旋光性按其构型及旋光性可分为L - 乳酸、D - 乳酸和DL 外消旋乳酸三类.它是世界上公认的三大有机酸之一, 是制造无毒的高分子化合物聚L- 乳酸的单体,也是医药、印刷、印染、制革、食品等工业的重要原料。 作为一种食品添加剂人体只含有L- 乳酸脱氢酶, 所以只能够分解自身产生或摄入的L- 乳酸, 所以高光学纯度的L- 乳酸更受市场的青睐。 自然界中可产生L - 乳酸的微生物很多,但产酸能力强,可应用到工业上的只有霉菌中的根霉及细菌的乳杆菌属、链球菌属及芽孢杆菌属,下表列出了一些主要的产L - 乳酸的微生物。 根霉属(Rhizopus)中产 L一乳酸的菌种很多, 有米根霉(Rhizopus oryzae)、黑根霉(Rhizopus nigricans)、华根霉(Rh.chinensis)、行走根霉(Rhizopus stolonifer)、小麦曲根霉(Rhizopus ritici)和美丽根霉(Rhizopus elegans)等十多种, 其中米根霉生产L一乳酸的能力最强。 米根霉菌落疏松或稠密, 最初呈白色, 后变为灰褐色或黑褐色。菌丝爬行, 无色, 于37-40℃生长。米根霉能够利用淀粉等廉价原料,营养要求粗放, 菌丝体大而易于分离, 利于L一乳酸的精制, 成为国内外广泛研究的发酵生产菌。 国内外对乳酸发酵生产的研究, 主要是从发酵原料的选择、菌种的选择和改良、发酵工艺技术的改进三个方面进行的 1.发酵制备L- 乳酸所用的原料及选择 1.1 发酵制备L- 乳酸所用原料的种类 目前国内外发酵制备乳酸所用原料多集中于农副产品，也有利用纤维等废弃物发酵乳酸的报道。 以玉米淀粉或玉米粉发酵制备乳酸； 以大米粉发酵制备乳酸； 以红薯淀粉发酵制备乳酸； 以纤维等废弃物发酵制备乳酸； 以废食品等为碳源进行乳酸制备。 Yu R C 等人对直接发酵农产品生产L- 乳酸进行了研究，其结果是每千克粗玉米淀粉原料生成350g 以上的L- 乳酸。 白冬梅等人对玉米淀粉先液化糖化再进行发酵，产酸71.65g/L。 吴清林等人直接对玉米粉进行发酵，通过物理方法处理，克服了淀粉浓度过高时基质变为凝胶而不能发酵的困难，不需经液化糖化程序。 发酵制备乳酸的发展方向是对淀粉质原料的直接应用，不需经过液化和糖化，这样可以大大简化工序、降低成本，为实现大规模的工业化生产奠定基础。另一发展方向就是利用低品位的原料( 如生物质原料、废纤维、厨房垃圾等)发酵制备乳酸，以实现资源循环利用和可持续利用。 1.2 发酵制备L- 乳酸原料的利用方式 发酵制备L- 乳酸原料利用方式的不同决定整个工艺的进程，影响生产的成本。目前发酵制备L- 乳酸对原料的利用方式主要集中于： ①先经液化再糖化，进而再经微生物利用； ②糖化和发酵同时进行； ③对淀粉质原料先萌发再进行发酵； ④对淀粉质原料直接进行利用，不经过液化糖化 处理，可简化工艺过程，但对菌种要求较高，目前产率较低。 2.菌种的选择和改良 2. 1 　菌种选育 菌种的优良直接关系到发酵过程的控制及其产量等,是发酵过程中的一个至关重要的影响因素。目前以米根霉为亲本的优良菌株的选育有: 1、常规诱变育种 诱变方法： 紫外线（UV）诱变处理 亚硝基胍(NGT)诱变处理 筛选方法： 琼脂块一变色平板法(Ap一BP)筛选 挑取产黄圈大的单菌落 丙烯醇的YPD平板筛选 只有乙醇脱氢酶（ADH）活性减弱的菌株才能生长。抑制ADH活性，降低丙酮酸向乙醇支路的转化，可能会提高丙酮酸向乳酸支路的碳流。 发酵复筛，得到最优突变株： 取原始菌株、初筛后的突变菌株进行初步发酵。测定乳 酸产量，选择出乳酸高产突变株。 郑志、姜绍通等，利用亚硝基胍(NGT)对米根霉As 3.3462进行诱变，在含丙烯醇的YPD选择培养基上筛选获得11株ADH活性降低的突变株，其中mut-2突变株发酵液中乙醇含量比原始菌株降低35.2%，乳酸含量提高了79.6%。研究结果还表明，突变株与出发菌株相比，生物量和对还原糖的利用速率均比原始菌株提高。 白冬梅等人 利用酸性馒头片富集