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人教版选修3专题2课题2第二课时动物细胞融合与单克隆抗体(共26张PPT)
(1) (1) (2) (3) (4) (5) 温故知新 思维发散 到目前我们学到的生物现象里,哪些过程与动物细胞融合相关? 受精作用:两个细胞(精子与卵细胞)识别并融合成一个细胞(受精卵)的过程。融合的本质是两个细胞的细胞核融合。 A细胞 B细胞 人工诱导 1.1动物细胞融合的概念 杂交细胞 概念:是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程(也称细胞杂交)。 一、动物细胞融合 杂交目的: 获得拥有亲代细胞优良性状的杂交细胞。 阅读课本P52及识图2-23,并完成学案第1页【学习过程】 细胞膜的流动性 灭活病毒、PEG、电激等 诱导的手段? 融合操作后细胞的类型? AB杂种细胞遗传物质有什么特点? 五种AA、AB、BB、A、B 含两种生物的遗传物质 1.2动物细胞融合过程 融合原理? 为什么灭活的病毒能作诱导剂? 灭活丧失感染性 保留融合活性 一、动物细胞融合 1.3动物细胞融合技术的意义和应用 一、动物细胞融合 比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途 植物体 细胞杂交 细胞膜的 流动性 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 离心、电刺 激、振动、 聚乙二醇 克服远源 杂交不亲 和,获得 杂种植株 动物细 胞融合 细胞膜的 流动性 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 除应用植物 细胞杂交手 段外,还有 灭活病毒 获得杂种细胞、制备 单克隆抗 体 1.4 比较动、植物细胞杂交技术 强调:效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞,课文将其简称为B淋巴细胞 抗体:能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 能产生抗体的细胞是浆细胞(即效应B细胞)。 B淋巴细胞 效应B淋巴细胞 记忆B淋巴细胞 抗原刺激 B淋巴细胞作用? 抗体本质?作用? 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点: 产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低。 怎样大量获得化学性质单一、特异性强的抗体呢? 提示1:对B细胞进行细胞培养可行吗? 提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的? 一个B淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 设计方案: 优点: 不能无限增殖,不能大量生产 缺点: 优点: 只分泌一种特异性抗体 能无限增殖 杂交瘤细胞 优点: 既能无限增殖(无限克隆), 又能分泌单一 性抗体 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 注射H7N9抗原后,从小鼠脾脏取出的是否只有针对H7N9的B淋巴细胞? ② 融合操作后会有几种细胞类型? ③如何筛选出杂交瘤细胞? ④ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一的H7N9性抗体? ⑤ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体? 单克隆抗体 问题思考 Q2 Q3 细胞融合后,有哪些细胞类型? B-B;B-瘤;瘤-瘤、B、瘤 如何筛选出杂交瘤细胞? 单克隆抗体的制备 选择培养基 Q1 注射H7N9抗原后,从小鼠脾脏取出的是否只有针对H7N9的B淋巴细胞? 例题:单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞,其合成核酸的途径能被氨基喋呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞混合,加入PEG促融后,再加入含氨喋呤的培养液。若将这些混合物分装于细胞培养板的小孔中培养,则小孔中的培养物不可能是 ( )A产生单一抗体的杂交瘤细胞B产生单一抗体的效应B细胞C不产生单一抗体的骨髓瘤细胞D不产生单一抗体的B淋巴细胞 C 问题思考 Q4 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一的H7N9性抗体? 还需怎样筛选出专一的H7N9抗体? 单克隆抗体的制备 利用抗原-抗体杂交,检测抗体阳性。 有限稀释法 稀释多次 稀释 将培养皿孔内的上清液取出,单克隆杂交瘤细胞得到更多特异性抗体。 单克隆抗体的制备 一:将杂交瘤细胞注入动物腹腔,从腹水 提取抗体; 二:在体外培养杂交瘤细胞,从培养液中 提取抗体。 Q5:如何大规模进行培养得到大量的 单克隆抗体?。 “生物导弹” =单克隆抗体+药物 2、治疗疾病和运载药物 主要用于治疗癌症治疗,单克隆抗体作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”,准确杀伤癌变细胞。 导向: 炸弹: 单克隆抗体 药物 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 ( ) A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点( ) 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【
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