第二章 植物细胞工程的理论基础.ppt

第二章 植物细胞工程的理论基础 §1. 细胞分化与细胞全能性 §2. 器官发生 §3. 离体培养下的遗传与变异 §1.细胞全能性 一. 细胞全能性的一般概念 二.细胞分化 三.离体培养中细胞的脱分化、再分化 一.细胞全能性的一般概念一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力称之为细胞的全能性。细胞全能性的绝对性与相对性:不是所有基因型的所有细胞在任何条件下都具有良好的培养反应;即使对于植物细胞而言，细胞全能性也并不意味着任何细胞均可以直接产生植物个体;动、植物细胞全能性的表现程度存在明显的差异。 植物细胞全能性表现根据细胞类型不同从强到弱: 营养生长中心 形成层 薄壁细胞 厚壁细胞(木质化细胞) 特化细胞(筛管、导管细胞)； 根据细胞所处的组织不同从强到弱为： 顶端分生组织 居间分生组织 侧生分生组织 薄壁组织(基本组织) 厚角组织 输导组织 厚壁组织。 二.离体培养中细胞的脱分化（Dedifferentiation）脱分化 外植体―→愈伤组织或 ↗体细胞胚↘完整植株 脱分化细胞↘不定器官↗直接伸长茎尖培养（较大时）――→完整植株 发育幼胚培养（较大时）――→完整植株 外植体：植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料，可以是器官、组织、细胞和原生质体等。 脱分化后的细胞，经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团称为愈伤组织。愈伤组织的种类 1、胚性愈伤组织 （Embryonenic callus）：表面光滑、组织结构紧凑、细胞小、再生力强。 胚性愈伤组织容易形成胚状体，所以被称为胚性愈伤组织。 2、非胚性愈伤组织：表面粗糙、组织结构疏松、细胞大。  注意： 1、并不是所有的细胞脱分化的结果都必然形成愈伤组织。有些植物体的细胞脱分化以后直接形成胚性细胞，进而形成体细胞胚。2、多数愈伤组织内的细胞并不都是未分化的细胞，即同一愈伤组织内的细胞之间其状态存在一定的差异。 三.细胞分化 所谓细胞分化，是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。分化也可以说是相同基因型的细胞所具有的各个不同的表现型。 时间上的分化：一个细胞在不同的发育阶段上可以有不同的形态结构和功能； 空间上的分化：对于多细胞生物来讲，同一细胞后代，由于所处的环境不同而可以有相异的形态结构和功能。 1．细胞分化与基因组变化 细胞分化过程中，可以观察到的最常见的变化是染色体的反复复制，而并不进行细胞分裂。核内染色体的复制过程可以区分出两种主要类型，一是核内有丝分裂，导致核内多倍体，二是大量复制染色丝，导致形成多线染色体。 在植物的分化发育中，另一类基因组的变化是基因重排。例如，在玉米、金鱼草等植物中，转座子的移动能引起很多发育性状的改变， 2.细胞分化与极性建立 极性是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。 在很多情况下，细胞的不均等分裂是是细胞极性建立的标志。 无论是在活体还是在离体条件下，目前一般认为，极性的建立和维管成分的产生，是植物细胞分化的基本特征。 3.细胞分化的过程 细胞分化可分为两个阶段： 决定：早期在动物发育研究中使用这一概念，它通常是指胚胎细胞在发育过程中发生的不可逆的特化现象。因此，决定就是细胞发育途径的确定，它是细胞分化的早期过程； 分化细胞特征逐渐表现：在大多数情况下，细胞从决定到表现特定细胞特征通常需要经过几代细胞的传递（细胞分裂）。 4.影响细胞分化的因素 a.激素 生长素能促进维管组织形成 细胞分裂素与木质部的发生有关 激素在细胞分化中的作用，可能是通过在转录或翻译水平上的调节作用而影响相关基因的表达从而调控细胞分化。但应该注意到，在植物中细胞种类的不同或同一种细胞不同的发育状态，均会影响该种细胞对激素的反应，即靶细胞反应差异，所以试图寻找不同激素在分化中作用的共同模式可能是很困难的。 b、蔗糖浓度 C、光照与温度 光照对于维管组织的分化具有促进作用，适宜的温度对于维管组织的分化是必需的。 §2.器官发生 一．离体培养中器官发生的方式 二. 器官分化的过程 三. 影响器官分化的因素 植物的离体器官的发生：培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根（adventitious roots）、不定芽（ adventitious shoots）等器官的过程。　不定根