食品及饲料中三聚氰胺残留量液相色谱检测方法的研究培训课件.ppt

食品及饲料中三聚氰胺残留量液相色谱检测方法的研究 严可嘉 食品质量与安全研究内容 前言 实验内容 结果与讨论 结论 前言 2008年9月，中国爆发三鹿婴幼儿奶粉受污染事件，导致食用了受污染奶粉的婴幼儿产生肾结石病症，其原因是奶粉中含有三聚氰胺。一时间三聚氰胺多次登上报纸头版头条，三聚氰胺的特性及其安全检测成为人们关注的焦点。 前言 由于三聚氰胺分子中含有大量氮元素,而普通的全氮测定法测饲料和食品中的蛋白质含量时不能排除这类伪蛋白氮的干扰,某些不法厂商添加三聚氰胺主要是利用三聚氰胺的高含氮量来增加产品的表观蛋白质含量。致使不仅是饲料生产商，其它的食品工厂也要求进行三聚氰胺的检测以保证他们产品的安全。所以对饲料生产商、奶制品厂家、水产品企业、肉制品企业和食品生产工厂（除农产品外）都有进行三聚氰胺检测的要求，从而掀起三聚氰胺检测方法的开发热潮。 前言 目前，三聚氰胺的检测方法主要有重量法、电位滴定法、试剂盒检测法（ELISA）、液相色谱检测法、液相色谱-质谱联用检测法和气相色谱-质谱联用检测法等。 实验内容 高效液相色谱仪：岛津LC-2010A，配可变波长紫外检测器、示差折光检测器（上海岛津），Waters SugarPak1糖柱（美国Waters公司） PHS-3C pH计（上海康仪仪器有限公司） AG204（0-210g）电子分析天平（万分之一）(瑞士METTLER TOLEDO) 移液器（1-50μl,100-1000μl,1000-5000μl） XW-80A漩涡混合器（上海精科实业有限公司） KQ5200型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司） 离心机 实验内容 称取5.0g粉碎均匀的样品于50mL具塞旋盖的塑料离心管中，加入25ml甲醇-水(9+1)，在旋涡混合器中混匀1min后超声20min，再在旋涡混合器中混匀1min，离心5min后取上清液过0.2μm的滤膜。吸取0.25mL滤液加入0.75mL0.1mol/L盐酸，混匀后过0.2μm的滤膜，在液相色谱上进行测定。 结果与讨论 结果与讨论 结果与讨论 以三聚氰胺浓度（mg/L）为横坐标，以三聚氰胺的峰面积为纵坐标，建立三聚氰胺的标准曲线，线性回归方程为y=68658x+1203.3，相关系数R2=0.9999，说明三聚氰胺在0.1mg/L~100mg/L的浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系。 结果与讨论 此次实验对宠物饼干、伊利纯牛奶、伊利酸牛奶、大豆蛋白粉、面包粉、高筋面粉、玉米淀粉、猪饲料、鱼饲料、淀粉等样品按实验方法进行测定,样品中三聚氰胺的含量均未超过国家限量标准。 线性回归方程为y=68658x+1203.3，相关系数R2=0.9999，说明三聚氰胺在0.1mg/L~100mg/L的浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系。 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%，本实验中两次独立实验结果的相对偏差为0.0023~0.0610，本次实验具有很强的重复性。 加标回收率为87.99%～106.24%，平均回收率为97.65%。液相色谱(HPLC)测定结果相对标准偏差RSD为1.01%-9.24%。这充分表明该方法满足分析要求。 结果与讨论 从目前测定三聚氰胺的方法分析，液相色谱法具有操作简单、实验室普遍具有、方法影响因素少等优点，是目前各类实验室采用的主要分析方法，但缺点是缺乏充分的定性依据以及灵敏度较低。 分析化学只是一个检测手段，即使有最方便最准确最可靠的方法来分析三聚氰胺，也只能保证老百姓不消费含有三聚氰胺的奶制品。三聚氰胺本不应该在奶制品中存在，可是如果在奶制品中含有另外一种对蛋白质含量检测产生正误差的物质，这个方法同样不可行。要保证食品安全、保证老百姓的生活质量，还得从生产原料的源头和生产过程的质量控制做起。 结论 本实验样品经过甲醇水提取，过0.2μm滤膜，采用高效液相色谱法测定,外标法定量，并做了加标回收实验，结果证明方法的精密度和准确度完全符合残留分析要求,干扰小,分离速度快,适合食品加工原料及饲料中三聚氰胺的快速筛选。 感谢大家！ 谢谢各位评委老师！ 谢谢在座的同学们！ 欢迎大家批评指正。 * * * * 一、实验仪器 一、实验方法 二、结果 0.30 玉米淀粉 1.18 面包粉 1.97 猪饲料 1.09 高筋面粉 1.58 鱼饲料 0.29 奶片 1.81 大豆蛋白粉 0.91 奶粉 0.60 淀粉 2.30 宠物饼干 三聚氰胺含量（mg/kg) 样品名称 三聚氰胺标准样的液相色谱图 三聚氰胺浓度与面积的关系 y=68658x+1203.3 R 2 =0.9999 0 2000000 4000000 6000