2018.3.4定稿选修3-1.2基因工程的基本操作程序.ppt

四 目的基因的检测与鉴定——检查是否成功 导入过程完成后，全部受体细胞都能摄入重组 DNA分子吗？ 真正能摄入重组DNA分子的受体细胞很少。 目的基因进入受体细胞后，是否都能稳定维持 和表达？ 不一定，需要检测 1.检测方法： 分子杂交技术： （1）DNA分子与DNA分子的之间杂交 （2）DNA分子与RNA分子的之间杂交 （3）蛋白质分子（抗原与抗体）之间杂交 2.个体生物学水平的鉴定： 抗虫、抗病结种实验，活性比较实验 1.检测 转基因生 物的DNA 探针 15N 15N 14N 14N （1）检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了 目的基因 基因探针： 放射性同位素等标记的DNA分子 方法： DNA分子杂交技术 变性 变性 如果显示出杂交带，就表明待测样品含有目的基因。 变性 方法： DNA分子杂交技术 （2）检测目的基因是否转录出了mRNA 探针 15N 15N 转基因生物 的mRNA 14N 14N 如果显示出杂交带，就表明待测样品目的基因已经转录。 提取 （3）检测目的基因是否翻译成蛋白质 方法：抗原-抗体杂交 苏云金杆菌 Bt毒素蛋白 将Bt毒蛋白注射小鼠体内 从小鼠血管抽出血液分离出抗Bt毒素的抗体 抗体 蛋白质 出现杂交带 脱分化 组织培养 证明：提取蛋白质与Bt毒素蛋白质一样 例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒