第一章　基因工程第1节基因工程2.ppt

* 第一节 基因工程概述—— 获取目的基因、制备重组DNA分子 学习目标 1．简述基因工程的基本操作步骤 2．说出获取目的基因的方法，比较PCR技术与细胞内DNA分子复制的异同 3．概述基因表达载体的组成 问题1：我国有知识产权的转基因抗虫棉的培育，需要经过哪四个关键步骤？ 问题2：什么是目的基因？ 问题3：基因文库与基因库、及基因文库与基因克隆的概念一样吗？ 问题4：从cDNA文库中获取的目的基因没有启动子，如果要实现将编码序列导入受体生物中并成功表达，基因表达载体还需哪些元件？基因表达载体中的各元件有何作用？ 目的基因的获取 1．获取目的基因的常用方法有哪些？ 2．基因文库有几种类型？怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因？ 3.PCR技术也是合成DNA分子的过程，属于合成反应，是消耗能量的，但课本PCR反应原理示意图中为什么没有提到能量？ 4. 1个DNA分子进行PCR扩增,循环n次，理论上至少需要几个引物？ 分离目的基因 基因文库 PCR 逆转录法： 化学合成法 mRNA DNA 氨基酸顺序 核苷酸顺序 人工合成基因 1个DNA分子进行PCR扩增,循环n次，理论上至少需要的引物是（2n-1）×2个。 【例1】基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间，这是应用了酶的（? ） A．高效性 　 B.专一性　　 C．多样性 　 D.催化活性受外界条件影响 B 【解析】根据题干中提供的信息，“一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间”可推断这是应用了酶的专一性特点。 基因表达载体的构建 1．一个基因表达载体是由哪些部分组成的？ 2．构建基因表达载体需要哪些条件？ 3．如何构建一个基因表达载体？ 4．基因表达载体有何作用？ 5．作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？ *