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官方说明书大鼠钙调素(CAM)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书
rat Calmodulin Vegetarian (CAM) elisa immune elisa kit Manual
/file/2435627
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大鼠钙调素(CAM)酶联免疫吸附测定试剂盒
使用说明书
品编号:E0640r
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中CAM 含量。
实验原理
用纯化的 CAM 抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物
素化的CAM 抗体、HRP 标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB 在过氧化物酶
的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 CAM 呈
相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度( 值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、 酶标板:一块(96 孔)
2、 标准品 (冻干品): 2 瓶,请临用前 15 分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至 0.5ml,
盖好后室温静置大约10 分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为 100 ng/ml,然后
做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成 100 ng/ml,50 ng/ml,
25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为
空白孔 0 ng/ml。如配制 50 ng/ml 标准品:取 0.3ml (不要少于 0.3ml )100 ng/ml
的上述标准品加入含有0.3ml 样品稀释液的Eppendorf 管中,混匀即可,其余浓度以此
类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
6、 检测溶液 A:1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液 A 1:100 稀释(如:10 检
测溶液A / 990 检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总
量配制 (100 /孔),实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。
7、 检测溶液B:1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液B 1:100 稀释。稀释方法同检
测溶液A。
8、 底物溶液:1×10ml/瓶。
9、 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25 倍。
10、终止液:1×10ml/瓶
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