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官方说明书大鼠雌激素(E)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
rat Estrogen Vegetarian (E) elisa immune elisa kit Manual
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大鼠雌激素(E)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中雌激素含量。
实验原理
用纯化的雌激素抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素
化的雌激素抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB 在过氧
化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的雌
激素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、 酶标板:一块(96 孔)
2、 标准品(冻干品): 2 瓶,请临用前15 分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至1ml,
盖好后室温静置大约10 分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为500 pg/ml,然后做
系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成500 pg/ml,250 pg/ml,125
pg/ml,62.5pg/ml,31.2 pg/ml,15.6 pg/ml,7.8pg/ml,样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。
如配制250 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml )500 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml
样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
6、 检测溶液A:1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液A 1:100 稀释(如:10 检测
溶液A / 990 检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配
制(100 /孔),实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。
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7、 检测溶液B:1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液B1:100 稀释。稀释方法同检
测溶液A。
8、 底物溶液:1×10ml/瓶。
9、 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25 倍。
10、终止液:1×10ml/瓶(2 mol/L H2SO4)。
11、覆膜:5 张
12、使用说明书:1 份
自备物品
1、 酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、 微量加液器及吸头,EP管
3、 蒸馏水或去离子水,滤纸
标本的采集及保存
1、 血清:全血标本请于室温放置2 小时或4 过夜后于1000 g 离心20 分钟,取上清即可检
测,或将上清置于-20 或-80 保存,但应避免反复冻融。
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