《动物细胞融合与单克隆抗体》课件（新人教版选修3）.ppt

4、单克隆抗体的应用 * 动物细胞融合与单克隆抗体 思考： 1、什么叫动物细胞融合？ 2、促进细胞融合的方法有哪些 ?　 3、细胞融合技术最大的优点是什么？ 4、植物体细胞杂交与动物细胞融合 有哪些异同？　 物理法 化学法 生物法 　电场法(效率高、伤害小、易操作) （离心、振动、电刺激） 聚乙二醇（PEG） 　灭活的病毒 （灭活的仙台病毒） 链接:病毒促融细胞 (一)动物细胞融合（细胞杂交） 总结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合 用 途 诱 导 方 法 融合前处理 原 理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、 果胶酶去壁 用胰蛋白酶 使细胞分散 物理、化学方法 物理、化学、 生物方法 获得部分 或完整植株 主要用于制备 单克隆抗体 回 顾 1、抗体的化学本质？ 2、抗体由什么细胞产生？ 3、抗体的作用特点？ 4、抗体的分布？ （二）单克隆抗体的制备 思 考：如何获取某种特定抗体？ 1、抗体的传统生产方法 再从动物血清中分离抗体 该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 输入 浆细胞 动物体内 某抗体 某抗原 一个B淋巴细胞——只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞——能无限增殖 杂交瘤细胞 既能分泌一种特异性抗体 又能无限增殖 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒设想： 2、单克隆抗体的制备过程 自学与思考： 1）在从小鼠体内取B淋巴细胞前应对小鼠作何种处理？ 为什么要这样处理？ 2）从小鼠何处获取B淋巴细胞？ 3）如只考虑两两融合，可能出现哪些融合类型细胞？ 4）是否所有杂交瘤细胞都能产生某一特定抗体？ 5）由特定的B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合成的杂交 瘤细胞具有什么特点？ 6）最后可以通过哪些途径大量获取抗体？ 1、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合? 小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量增殖， B淋巴细胞能够产生抗体， 细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活。 2、骨髓瘤细胞是癌细胞吗? 有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞， 具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞， 所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。 杂交细胞 灭活的病毒等手段 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 经免疫的小鼠 提取 杂交瘤细胞 第一次筛选 用特定的选 择性培养基 第二次筛选 能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞 体外培养 注射到小鼠腹腔 提取单克隆抗体 （3）整个制备过程为何要经过两次筛选? 第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种）， 第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。 单克隆抗体： 特异性强、纯度高、灵敏度高， 产量大、容易标准化生产。 3、单克隆抗体的优点 １、可用于作为诊断试剂： 有准确，高效，简易、快速的优点 ２、可用于疾病治疗 ３、可用于运载药物 （作为运载对应疾病的药物的 “生物导弹”。） “生物导弹”＝单克隆抗体＋药物 例题1： 1975年，英国剑桥大学分子生物学实验室的科勒和米尔斯坦，把小鼠的淋巴细胞（脾细胞）和小鼠的骨髓瘤细胞融合起来，成为杂交瘤细胞，实现在体外大量生产抗体的目的。实验过程如图所示。 (1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合” 在一起，说明细胞膜 。 (2)单克隆抗体的准确定义应为 ( ) A．一类特殊抗体 B．无性繁殖系 C．单一抗体细胞的无性繁殖第产生的抗体 D．单一抗体细胞的有性繁殖系产生的抗体 (3)杂交瘤细胞繁殖进行的是_______分裂，其遗传性状__________。 (4)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”这是利用了 _____________ 。 具有一定的流动性 C 有丝 不变 抗体能与抗原发生特异性结合的特点 [变式练习] 右图为细胞融合的简略过程，请据图回答： ⑴ 若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已 用 处理，除去