褪黑色素对人视网膜色素上皮细胞氧化损伤保护作用的研究-眼科学(晶状体视网膜疾病)专业论文.docx

福建医科大学2005级硕士研究生毕业论文中英文对照表英文缩写 英文全称 中文对照ADP 腺昔二磷酸ARMD ．age。related macular degeneration 年龄相关性黄斑变性ATP 三磷腺昔Caspase．3 ．。细胞凋亡蛋巍酶DNALadder DNA梯DMSO．．dimethyl sulphoxide 二甲基亚砜 GSH．reduced glutathione hormone 还原型谷胱甘肽 GSSG．．glutathione disulfide 。氧化型谷胱甘肽HO 。heme oxygenase ．。血红素氧化酶H202 。hydrogen peroxide 。过氧化氢LPF lipofuscin 脂褐素MDA ．．maleic dialdehyde ．丙二醛MEL melatonin 褪黑色素MTT methyl thiazolyl tetrazolium ．四唑盐比色试验 RPE ．．retinal pigment epithelial 视网膜色素上皮细胞 SOD 。superoxide dismutase 超氧化物歧化酶2福建医科大学2005级硕士研究生毕业论文学位论文原创性声明和版权使用授权书学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的 真实成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的 作品成果。对本论文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完 全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名(手写)：邋导师签名(手写)：蓼盛年』月』日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留 并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本 人授权福建医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)枞名 婿导师签名(手写)：h一一丝加一 丑手OL6一一 埘手福建医科大学2005级硕士研究生毕业论文褪黑色素对视网膜色素上皮氧化损伤保护作用的研究中文摘要 目的：探讨褪黑色素(melatonin，MEL)对过氧化氢氧化损伤的人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial，RIPE)的保护作用及其机制。 方法：采用600越mol·l-1的过氧化氢造成体外培养的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤模型。过氧化氢作用时间为l矗。试验分为：对照组、过氧化氢模型组、过 氧化氢+10‘7mol·FIMEL组、过氧化氢+10击mol·IqMEL组、过氧化氢+10。5mol·r1MEL组、过氧化氢+104mol·l-IMEL组。通过MTT法检测细胞活性； 测定细胞内SOD和MDA检测细胞氧化损伤程度；分别用DNA Ladders法电泳和 Annexin V-FITC／PI双染法流式细胞术定性和定量检测细胞的凋亡情况。结果：l 过氧化氢氧化损伤作用可以显著降低细胞的活性，与对照组相比较，差 异有极显著性，P0。01。MEL各组的a490值均明显增舞，与模型组比较，差异 有显著性，P0。01。菰且随着MEL浓度的升高呈有升高的趋势。2与对照组比较，过氧化氢模型组SOD活性明显降低，而MDA含量增高， 差异有显著性，P0．Ol。与过氧化氢模型组比较，MEL药物干预各组SOD活 性随MEL浓度增大有升高趋势，MDA含量随MEL浓度增大而减少，差异具有 显著性，P0．01。3细胞凋亡情况的观察：3．1 DNA Ladders法半定量检测MEL对过氧化氢氧化损伤的人RPE细胞凋 亡情况。结果发现：对照组几乎没有细胞凋亡的小片段DNA条带，氧化损伤组 可见接近180．200bp整数倍的DNA条带，而在各个MEL干预组，发现这种凋亡条带较氧化损伤组明显减弱，其中在过氧化氢+106mol·IqMEL组表现最为明显。3．2 Annexin V-FITC／PI双染法流式细胞术检测RPE凋亡流式细胞仪分析各 个实验组的细胞凋亡率。与对照组比较，过氧化氢模型组的凋亡率明显升高；与 过氧化氢模型组比较，各个MEL药物干预组细胞凋亡率均降低，且凋亡率随着 MEL药物浓度的增高呈下降趋势，细胞凋亡率分别为：4％、51％、45％、32％、3福建医科大学2005级硕士研究生毕业论文20％、22％。结论：本实验研究证实过氧纯氢对RPE氧化损伤作用导致细胞活性降低、氧能 还原功能减弱、细胞凋亡加速，MEL可以拮抗过氧化氢的氧化损伤，增强细胞的 活性和氧化还原功能，抑制RPE凋亡的发生，对RPE起保护作用。为临床上应用 MEL治疗与氧化损伤有关的视网