微生物的遗传变异和育种要点︰四个概念︰遗传型表型变异.docVIP

第七章 微生物的遺傳變異和育種 四個概念︰遺傳型、表型、變異和飾變。 三個經典實驗︰經典轉化實驗、噬菌體感染實驗和植物病毒重建實驗證實了核酸是一切生物的遺傳物質基礎。 基因突變︰遺傳變異的基礎，其中以營養缺陷型和抗藥性突變株為代表的選擇性突變株具有重要理論與實際應用價值。從分子水準上看，誘發突變主要有鹼基置換、移碼突變和染色體畸變三類。基因突變分為自發突變和誘發突變。 誘變育種︰其主要步驟是出發菌株的誘變處理和突變體的篩選。營養缺陷型的篩選一般要經過誘變、淘汰野生型、檢出和鑑定營養缺陷型四個環節。 基因重組︰基因重組是比基因突變更高層次、更為複雜的變異模式。原核生物基因重組的類型主要有轉化、轉導、接合和原生質體融合等多種，真核微生物則有有性雜交、準性雜交和原生質體融合等多種。 基因工程︰透過人工操縱DNA而實現的定向育種手段，可達到超遠緣雜交育種，前景寬廣。 第一節 微生物的遺傳變異的概述 （一）遺傳型 又稱基因型，指某一生物個體所含有的全部遺傳因子即基因組所攜帶的遺傳訊息。遺傳型是一種內在可能性或潛力，其實質是遺傳物質上所負載的特定遺傳訊息。具有某遺傳型的生物只有在適當的環境條件下，透過自身的代謝和發育，才能將它具體化，即產生表型。 （二）表型 指某一生物體所具有的一切外表特徵及內在特性的總和，是其遺傳型在合適環境下透過代謝和發育而得到的具體體現。所以，它與遺傳型不同，是一種現實性。 （三）變異 指在某種外因或內因的作用下生物體遺傳物質架構或數量的改變，亦即遺傳型的改變。變異的特點是在群體中以極低的機率(一般為10-5～10-10)出現，性狀變化的幅度大，且變化后的新性狀是穩定的、可遺傳的。 （四）飾變 指一種不涉及遺傳物質架構改變而只發生在轉錄、翻譯水準上的表型變化。其特點是整個群體中的幾乎每一個體都發生同樣變化；性狀變化的幅度小；因其遺傳物質不變，故飾變是不遺傳的。例如，Serratia marcescens(粘質沙雷氏菌)在25℃下培養時，會產生深紅色的靈杆菌素，它把菌落染成鮮血似的。37℃下時，群體中的一切個體都不產色素。25℃，所有個體又可恢復產色素能力。S.marcescens產色素能力也會因發生突變而消失，但其機率僅10-4，且這種消失是不可恢復的。 對微生物遺傳變異規律的深入研究，不僅促進了現代生物學的發展，而且還為微生物育種工作提供了豐富的理論基礎。 第二節 遺傳變異的物質基礎 1944年后由於連續利用微生物這一有利的實驗對象設計了3個著名的實驗，才以確鑿的事實證實了核酸尤其是DNA才是遺傳變異的真正物質基礎。 （一）經典轉化實驗 最早進行轉化實驗的是英國醫生F.Griffith（1928年）。S型；有的不形成莢膜，無致病性，菌落外觀粗糙，故稱R型。F.Griffith做了以下3組實驗︰ 1．動物試驗 2．細菌培養試驗 3．S型菌的無細胞抽提液試驗 S型細菌，在其細胞內可能存在一種具有遺傳轉化能力的物質，它能透過某種模式進入R型細胞，並使R型細胞獲得表達S型莢膜性狀的遺傳特性。 1944年，Avery等人從熱死的S型肺炎鏈球菌中提純了可能作為轉化因子的各種成分，並深入到離體條件下進行了轉化實驗。 (1) 從活的S菌中抽提各種細胞成分（DNA、蛋白質、莢膜多糖等） (2) 對各生化組分進行轉化試驗 加S菌的DNA 加S菌的DNA和DNA 以外的 長出S菌 加S菌的DNA和DNA 活R菌 加S菌的RNA 加S菌的蛋白質 只長R菌 加S菌的莢膜多糖 上述結果表明，只有S型菌株的DNA才能將肺炎鏈球菌的R型轉化為S型，而且DNA的純度越高，其轉化效率也越高，直至只取用6×10-8g的純DNA時，仍保持轉化活力。S型轉移給R型的絕不是遺傳性狀（在這裡是莢膜多糖）的本身，而是以DNA為物質基礎的遺傳訊息。 1952年，A.D.Hershey和M.Chase發表了證實DNA是噬菌體的遺傳物質的著名實驗──噬菌體感染實驗。,他們將大腸杆菌培養在以放射性32PO43-或35SO42-作為磷源或硫源的合成培養基中，從而獲得含32P-DNA核心或含35S-蛋白質外殼的兩種實驗用噬菌體。接著，他們作了以下兩組實驗(圖7-1)。 圖7-1 大腸杆菌噬菌體的感染實驗 32P-DNA 核心的噬菌體作感染； 下︰用含35S-蛋白質外殼的噬菌體作感染 7-1兩組實驗中可清楚地看到，在噬菌體的感染過