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- 2018-05-11 发布于河南
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一、实验目的 学习细菌的革兰氏染色原理和方法 了解细菌的特殊形态结构:芽孢、荚膜、鞭毛 二、实验原理 单染色法:只能观察微生物的大小、形状、和细胞排列状况,但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。 复染色法:用两种或两种以上染色液进行染色,有协助鉴别微生物的作用,故也称鉴别染色法。常用的有:革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法等。 革兰氏染色 丹麦C.Gram创立,用于细菌分类学研究 细菌细胞壁的结构 G-肽聚糖层较薄,交联度低,含较多脂质,故用乙醇等有机溶剂脱色时融解了类脂质,增加了细胞的通透性,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出,经沙黄复染呈红色。 G+细胞壁结构致密,用脱色剂处理后,肽聚糖层孔径缩小,通透性降低,故细菌仍保留初染时的紫色。 细菌的特殊形态结构 芽孢:休眠体,不利环境下产生,耐受各种极端环境。 荚膜:多糖,包裹在菌体外围,保护菌体 鞭毛:运动,菌落形态。 三、实验材料 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌(24h培养物) 革兰氏染色液一套 四、实验步骤 革兰氏染色 枯草杆菌的芽孢观察 观看鞭毛、荚膜的示范片 绘图、写实验报告 革兰氏(Gram)染色法 1. 涂片 2. 初染:在做好的涂面上滴加草酸铵结晶紫染液,染1分钟,倾去染液,流水冲洗至无紫色。 3. 媒染:先用新配的路哥氏碘液冲去残水,而后用其覆盖涂面1分钟,后水洗。 4. 脱
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