2017-2018学年高二生物人教版选修一教学案：专题5+课题3+血红蛋白的提取和分离+Word版含答案.docVIP

一、蛋白质提取、分离蛋白质分离的理论依据 2．凝胶色谱法(分配色谱法)(1)概念：根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。(2)分离原理相对分子质量较小的蛋白质容较长移动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道只能在凝胶外部移动路程较短移动速度较快。 3．缓冲溶液(1)作用：在一定范围外界酸和碱对溶液pH的影响维持 pH基本不变。(2)配制：通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内的缓冲液。电泳(1)概念：带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。(2)原理许多重要的生物大分子如多肽、核酸等都具有可解离的基团在一定的pH下这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同使带电分子产生不同的迁移速度从而实现样品中各种分子的分离。二、血红蛋白 1．样品处理(1)红细胞的洗涤目的：去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化。过程：分离(低速短时间离(2)血红蛋白的释放目的：使红细胞破裂释放血红蛋白。过程 (3)分离血红蛋白溶液：离心(以2 000 r/min速度离心10 min)→观察到离心管中的溶液分为4层从上往下依次为：第1层：无色透明的甲苯层。第2层：脂溶性物质的沉淀层——白色薄3层：血红蛋白的水溶液——红色透明液体。