中山大学硕士研究生生物医学课程 转录调控基本方法幻灯片.pptVIP

* dp5上调是神经元凋亡所必需 * siRNA * Jonathan Ham Lab * ATF位点介导c-Jun靶基因上调 * 反式作用因子 c-Jun/ATF2 ATF site TTACCTCA c-Jun异二聚体的靶序列 * * * * * * c-Jun/ATF2形成二聚体 Immunoprecipitation (IP) c-Jun/ATF2介导ATF活性 * 抑制c-Jun或ATF2保护神经元凋亡 * 干扰c-Jun、ATF2抑制神经元凋亡 * atf-decoy抑制神经元凋亡 p12ATF -( TTACATCA )- c-Jun/ATF2 p12ATF -(GGACATCG)-mut c-Jun 、ATF2协同促凋亡 constitutively activate c-Jun/ATF2二聚体促进神经元凋亡 * BiFC (Bimolecular Fluorescence Complementation Assay) Chang-Deng Hu et al. 2002, Mol Cell 凋亡时BiFC增多 * Fos↑→BiFC↓, Fos↓→BiFC↑ Fos抑制c-Jun/ATF2二聚体形成 * Fos保护神经元 * * 转录调控研究常用方法 1. 检测基因的表达水平： mRNA：RT-PCR Prot